伊谷藻琼胶及其级产物的制备和结构特性的研究.pdfVIP

谨以此论文献给我亲爱的家人及敬爱的老师 张宇 伊谷藻琼胶及其分级产物的制备和结构特性的研究 摘要 伊谷藻大量分布在日本、朝鲜及俄罗斯半岛，但目前尚未被广泛的开采和利 用。本文以伊谷藻为原料，建立了一种环境友好型的伊谷藻琼胶制备技术，并将 所制备的琼胶与其他琼胶原藻制备的琼胶品质进行对比和分析；以制备所得伊谷 藻琼胶为原料，进一步分离纯化其中的琼脂糖和硫琼胶，并对纯化所得多糖的品 质和结构进行研究。本课题旨在为琼胶、琼脂糖、硫琼胶的制备开发新的原料和 高效的生产工艺，不断扩展和加速我国海藻产业的发展，提高其国际竞争力。 ⑴ 伊谷藻琼胶的提取工艺及其品质研究：通过比较热水浸提法，稀酸液浸 提法和稀碱液浸提法对伊谷藻琼胶提取率的影响，确定稀碱液浸提法为伊谷藻琼 胶的提取方法。通过单因素试验，确定稀碱液浸提法的最佳提取条件为：NaOH 浓度 1.2%，料液比1：30 （g/mL ），121℃，浸提时间2h 。同时通过单因素试验 和响应面优化试验，确定伊谷藻琼胶的最佳漂白条件是：有效氯浓度0.18%，漂 白液 pH 5.39 ，漂白时间 10min 。最终所制备的伊谷藻琼胶的提取率为 2 18.10±0.70%、凝胶强度为1030.50±74.26g/cm 、透明度为48.10±1.20%、灰分为 1.19±0.14%、硫酸根为0.55±0.08%、3，6- 内醚半乳糖为33.29±1.63% 。结果表明， 开发以伊谷藻为制备琼胶的新原料与传统琼胶原藻相比，生产工艺简单，耗碱量 少，对环境的污染减轻，而且琼胶的品质优良，具备良好的开发前景和应用潜能。 ⑵ 伊谷琼脂糖的分离纯化及品质研究：以制备所得伊谷藻琼胶为原料，通 过三种方法制备出不同品质的伊谷藻琼脂糖，同时与商业化的琼脂糖进行对比， 对伊谷藻琼脂糖的品质进行分析和评价。结果表明，双水相萃取法制备的琼脂糖 其硫酸根和灰分含量分别为 0.28±0.02%和 0.80±0.09%，没有达到琼脂糖的产品 标准；同时琼脂糖电泳图谱条带模糊，进一步证实了单纯的双水相萃取法无法制 备出高品质的琼脂糖。但是双水相萃取法反应时间迅速，便于实现连续化操作， 因此可以作为琼脂糖的粗提制备。DEAE-Cellulose 阴离子交换树脂纯化制备的琼 脂糖的硫酸根和灰分含量为0.15±0.02%和0.16±0.01%，电内渗值为0.120±0.01% ， 以其作为电泳基质时，电泳图谱清晰，该琼脂糖的品质与BIO WEST 公司生产 琼脂糖和 Sigma 公司生产的中电内渗琼脂糖品质相当。双水萃取和 DEAE-Cellulose 阴离子交换树脂纯化相结合所制备的琼脂糖的硫酸根和灰分含 量为0.07±0.02%和0.11±0.07%，电内渗值为0.113±0.02%，与前两种伊谷藻琼脂 糖相比，这种方法制备的琼脂糖品质最佳，与Sigma 公司生产的低电内渗琼脂糖 的品质相当。 ⑶ 伊谷藻硫琼胶的分离纯化及结构研究：为了全面的探究伊谷藻琼胶的分 级组分，在DEAE-Celluose 阴离子交换树脂用蒸馏水洗脱出琼脂糖组分后，用 不同浓度的NaCl 溶液对其进行梯度洗脱，得到了伊谷藻硫琼胶的两个组分，即 0.5M NaCl 洗脱级分和 1.0M NaCl 洗脱级分。结果表明，0.5M NaCl 洗脱组分和 1.0M NaCl 洗脱组分的硫琼胶的单糖组成均为甘露糖和半乳糖；分子量分别为 4569.30Da 和4760.30Da ，该较低的分子量为伊谷藻硫琼胶功能产品的开发提供 了有利的条件。通过红外光谱扫描和紫外光谱扫描分别对0.5M NaCl 洗脱组分 和1.0M NaCl 洗脱组分的特征基团和纯度进行了分析和鉴定，结果表明两组分 均含有硫琼胶的特征官能团，且均不含有蛋白质及核酸等杂质。 关键词：伊谷藻；琼胶；琼脂糖；硫琼胶 Studies on the Preparation and Characterization of Agar, Agarose, and Agaropectin from the red alga Ahnfeltia plicata