小麦杂交种与亲之间差异表达est的克隆和鉴定.pdfVIP

小麦杂交种与亲本之间差异表达EST的 克隆和鉴定 研究生：刘卡 导师：孙其信教授 倪中福副教授 摘要 许多研究表明，在杂种优势形成的过程中，杂交种与亲本之间的基因表达发生显著的变化。 为了更深入探讨小麦杂种优势形成的分予机理，需要对这些差异表达基因进行研究。本文以3338／ 京冬6号组合为材料，采用cDNA--AFLP技术对拔节期叶片和根、抽穗期旗叶、授粉后6天和 授粉后12天的正反杂交的种子中差异表达基因进行了探讨与研究，取得主要结果如下： 1．在拔节期叶片和根、抽穗期旗叶、授粉后6天和授粉后12天的正反交种子中回收差异表达 片段1001条，并按照差异表达图谱对各种差异表达类型与杂种优势的关系进行了探讨，结果表 明：1)不同时期，各种差异表达类型在总的差异表达基因片段中所占的比例不同。2)随着生育 期的不同，各种差异表达类型所占比例的变化趋势也不尽相同，3)各生育期各组织中差异表达 基因片段在总的差异表达片段所占的比例不同，这说明各生育期各组织中基因差异表达情况有所 不同。 表现真实差异。并对其中32个片段进行克隆测序分析，结果表明其中22个eDNA片段与已知功 能的基因有较高的同源性，相应基因与多个生理生化途径有关：包括糖代谢(1个)、脂类代谢(3 个)、蛋白质代谢(2个)、氨基酸代谢(2个)、调控蛋白(1个)、物质运输(1个)、能量转换 外还有10条eDNA片段功能未知。 3．利用电子克隆获得了14．3．3蛋白基因完整的开放阅读框(ORF) 关键词：小麦，杂种优势，cDNA--AFLP，差异表达EST，分子机理 and Identificationof EST Cloning DifferentiallyExpressed between and its Parental in Fl Inbreds Hybrid aestivum L．) Master：Liuka Qi】【iIl Superviser：Sun Ni zhongfu Abstract The molecularbasisofheterosisor is understoodits hybridvigor poorly despite inevolution perceivedimportance and in thataim significance practical breedingprograms toincreaseof studieshave yield showedthat in cr