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小蓟多糖的分离纯化及生物学作用研究 张欣 为菊科植物，在我国分布广泛，资源丰富。它具有凉血止血，祛瘀消肿的功能，为 传统的中药。小蓟同时也可以食用，作为药食两用的野生植物资源含有丰富的营 养物质，为人们喜爱的民间野菜。多糖具有丰富的药理活性，且无毒副作用，己 广泛应用于临床及保健品市场。为了进一步开发利用小蓟资源，本试验对小蓟多 糖的提取分离、组成结构及其生物活性进行了研究。 本实验以陕西周至的小蓟干料为原料，进行了小蓟营养成分的测定；小蓟多 糖的最佳提取工艺、分离纯化及对所得组分进行了纯度鉴定、分子量测定和组成 半纯品的体外抗氧化活性；通过动物实验进行了小蓟租多糖生物学作用研究。通 过以上研究，为综合开发利用小蓟资源提供参考和依据。 主要实验结果如下： 1．小蓟中灰分含量为8．760％、粗蛋白质含量为4．470％粗脂肪含量为O．430％。 在已测定的17种氨基酸中，氨基酸总含量为2．060％，其中人体必需的氨基酸有 7种，占氨基酸总含量的42．526％。在已测定的15种矿物元素中，含有9种人体 必需元素，其中Ca、Mg的含量较高；有害元素Hg、As、Pb及Cd的含量较低。 2．热水浸提小蓟多糖的最佳工艺为：提取温度90(2，提取时间120rain，料液比 为l：10。 3．超声波辅助提取小蓟多糖的最佳工艺参数为：功率250W，提取20rain，料 液比为l：15。 4．木瓜蛋白酶+Sevag法为最佳脱蛋白方法，即可较完全的脱除粗多糖中的蛋 白成分，又能大大降低多糖的损失率。蛋白脱除率达96．45％。 G．200柱层析分离到CSK-A’、CSK．B’、CSK．C’、 5．经过DEAE．52和Sephadex CSK-D’四种多糖组分。 6．四种精制级分纯度鉴定：紫外光谱显示在260rim、280rim处均未发现核酸 和蛋白质的吸收峰；醋酸薄膜电泳都得到单一色带；SephadexG一200柱洗脱后，四 种多糖的洗脱峰基本均匀对称。 G．200柱层析测定它们的分子量分别为20．7kD、 7．组成和结构分析：Sephadex 葡萄糖组成，质量比为6．31：8．52：1．03，CSK-B’主要有鼠李糖、山梨糖和葡萄糖 组成，质量比为6．97：1．52：O．98，CSK-C’主要有木糖、果糖、山梨糖和葡萄糖组 成，质量比为7．01：8．93：3．04：1．03，CSK．D‘主要有果糖、半乳糖、葡萄糖组成， 质量比为2．10：9．85：1．05；红外光谱分析得知：四种组分的红外吸收光谱均为典型 的多糖吸收谱线，即在1400cm-I．1200cm“是C．H变角振动，2930cm1为C．H伸 缩振动区，3400 收峰。为C．o伸缩振动。另外1110cm1附近有吸收峰表明各组分多糖的单糖为六 元杂环，1640cm-I．1600cm“是乙酰氨基的特征峰。各组分多糖的红外光谱图在 酰氨基团。 8．小蓟多糖半纯品体外抗氧化活性试验表明： 清除作用，且随加入量的增加，清除率上升，即清除率与多糖的用量存在一定的 的抑制作用次之，CSK．C虽具有一定的清除作用，但作用较弱。而CSK．A几乎没 有清除·OH的作用。 作用。且随加入量的增加，清除率上升，即清除率与多糖的用量存在一定的量效 关系。其中CSK．C的清除作用最强，加入浓度为2．5 mg／mL可达N53．64％，CSK．A、 体系的作用。 9．小蓟粗多糖动物试验表明： (1)小蓟粗多糖能有效降低小鼠血清甘油三酯和胆固醇含量．提高小鼠血清高 密度脂蛋白的含量，对小鼠的脂质代谢具有明显的调节作用。 (2)小蓟粗多糖能够有效抑制小鼠血清和脑组织的单胺氧化酶(MAO)活性。 可以提高受试小鼠血清、肝组织、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽 过氧化物酶(GSH．PX)及血清、肝组织中过氧化氢酶(CAT)的活性。表明小蓟粗多 糖对D-半乳糖导致的小鼠的衰老具有一定的缓解作用。 (3)小蓟粗多糖能明显延长小鼠负重游泳时间、降低运动后血清尿素氮(BUN) 含量、减少肝糖原的消耗量、提高血清乳酸脱氢酶(LDH)的活性，说明小蓟粗提取 物能有效减轻过度运动对小鼠机体造成的伤害。 关键词： 小蓟 多糖