最新发酵过程中工艺参数控制及检测.ppt

第七章 发酵工艺控制 第?一节 工业发酵的重要类型 第二节 发酵过程的主要控制参数 第三节 菌体及基质浓度对发酵的 影响及控制 第四节 溶氧的浓度对发酵的影响及控制 第五节 pH对发酵的影响及控制 微生物发酵过程中的动力学类型 比速率：是1克细胞每小时形成产物的克数或每克细胞每小时利用糖的克数（g/g.h）或每克细胞每小时繁殖细胞的克数。 第?二节、? 发酵过程的主要控制参数 工厂设备越先进，产品附加值越高，检测的参数就越多。但工厂生产讲究越简单越好。发酵控制一般分为物理、化学、生物三类。 一、物理参数 1．? 温度：最适生长温度，它与酶反应速率，氧的溶解、产物合成都有关。①如四环素生产菌在30℃时合成金霉素，35℃时，只产生四环素，合成方向会改变。②生长温度与合成温度不同。如青霉素，生长30℃，合成24.7℃。 一、物理参数 4．搅拌功率（KW） P/V KW/m3 生产上：一般用瓦特计直接测量电动机的耗用功率，从中减去各项传动摩擦所损耗的功率。对小罐，误差较大。用电阻应变式动力计测量。 一、物理参数 5．? 通气量（V/V.min） 气体流量用转子流量计测量。用m3/m3. min，指每分钟每立方米发酵液通进1立方米空气，用1︰1表示。 如柠檬酸1︰0.15，而青霉素1︰1。  二、化学参数 1．? PH：发酵过程中产酸或产碱的生化反应的综合结果。细菌是多少？酵母、霉菌、放线菌？  二、化学参数 2．? 基质浓度：指营养成分的浓度，发酵过程中必须定时测定还原糖，总糖，磷酸盐、氮（氨基酸或氨氮）等基质的浓度。  二、化学参数 3．? 溶解氧浓度：mmol/L, mg/L, ppm或用% （指饱和浓度的百分数）表示。利用它的变化可了解生产菌对氧利用的规律也能反映发酵的异常情况。科研上用于检测设备供氧能力的指标。 二、化学参数 5．? 产物的浓度：ug/ml，生产中合成期产物的浓度需要测定，如柠檬酸生产用NaOH滴定，抗生素用抑菌圈大小测定。 二、化学参数 6．? 废气中氧和二氧化碳的浓度：用顺磁氧分析仪测定氧气的浓度，用红外二氧化碳分析仪测定二氧化碳浓度，如氧气减少和二氧化碳增加表明是好氧代谢的结果。 三、生物参数 1.菌丝形态：观察菌丝形态是生产 中最常用的方法。每隔8小时镜检， 能及时发现异常染菌。如青霉素生 产，生产菌生长分为I.孢子发芽， II.菌丝增殖，III.菌丝分枝旺盛， 出现脂肪颗粒，IV.菌丝生长减缓， 细胞内出现小气泡，V.气泡增大， 颗粒消失，产物形成，VI.气泡延伸 ，菌丝自溶。 第三节 菌体及基质浓度对发酵的影响及控制 3.1 菌体浓度 对初级产品来说，菌浓愈大，产量愈高，但菌浓符合生长曲线。象柠檬酸生产由糖转化成酸。 次级产品如菌浓过大，由于代谢产物的积累，会影响产量。因其产品与原料并非对应（或底物抑制，分介产物抑制等）。 ③磷酸盐：P是核酸，许多辅酶，ATP，组成部分，P对微生物生长、代谢有重要作用。 工业多以供应KH2PO4、K2HPO4为磷源，配料时， KH2PO4计算，每克KH2PO4理论磷含量227毫克，如将其溶在1L水中，就是227ppm。用链霉菌生产四环素时，菌体生长最适磷为65-70ppm，合成为25-30ppm。 测定方法：磷与钼酸铵（NH4）2M0O4作用，生成磷钼酸铵，在酸性条件下，用VC还原，生成钼蓝，然后比色。 3.3基质浓度的控制 分批补料培养（fed-batch culture,简称FBC），是指在分批培养过程中，间歇和连续地补加一种或多种成分的新鲜培养基的培养方法。有报道四环素发酵不补料的话，培养72-96h，发酵单位5500-7000单位/mL，而补糖的批号，发酵周期延长到120-130h，单位提高到10000-12000u/ml。 FBC的内容 ①补碳源、氮源（无机和有机），如蛋白胨、玉米浆、硫酸铵、尿素。 ②无机盐，微量元素，前体和促进剂。 ③补全料和补水，总之视情况不同，补单项还是全部。 补料的时间和方式 补料的时间很重要，有人研究加糖时间对四环素发酵单位的影响。 接种 20h 45h 62h 产量 6000 u/ml 10000 u/ml 5000 u/ml 一般认为，过早补糖