阿特拉津高效降菌及其降解酶粗酶液特性的研究.pdfVIP

摘 要 阿特拉津是均三氮笨类内吸传导型除草帮，J’泛用于玉米、高粱、甘蔗、果园等防除一年生 禾本科杂草及阔叶杂草，在农业生产中具有重要作用。阿特拉津在全世界火面积推广应用后，其 对农珥及地下水酶污染、对压茬作耪的药襄、对人类潜在的遗传毒性笛融题日益突出。为了利用 安全高教的生物降解技术控制和消除阿特拉洋在农田环境中的残留污染，本研究分离、筛选对阿 特拉津具有赢效降解能力的菌株，研究了降解菌及其降解酶特性，为开发和应用酶制剂提供基础。 本研究结果对控制农田污染，促进粮食安全生产，保障人类身体健康，僳护生态环境均其有重要 意义。具体研究结果如F： 应用摇瓶酿l化珞莽方法，从滗北、山农等墙农药厂捧污[：：l淤泥中分离得到4株对§玎特拉津有 降解能力的细菌；比较菌株对阿特拉津的降解效率，从中筛选fⅡ1株高效降解新菌株BZB一1。 运用形态与生理生纯特征获发16S 生理生化特征：革兰氏阴性菌，细胞呈长杆状，无芽孢，极生鞭毛，具有运动性，氧化酶阳性， 接触酶雕性。该菌株为好氧、氧化型(菲发酵型)细港，能利用葡萄糖和乙醇，不能利用甲醇和 精氨酸脱羧酶阴性，晦氢酸脱羧酶阴性，赖氨酸脱羧酶阴性，枸橼酸盐阴性，硝酸盐还原阴性， 乳糖苷酶(ONPG)阴性，蔗糖水解酶阳性，麦芽糖水解酶阳性，木糖水解酶阳性，葡萄糖水解 酶|；日性，硫化氢阴性。BZB．1菌株的16SrDNA基闲序列与Shinella 源性达到99％，结合菌株的形态和生理生亿特性，综合判定该菌株为Shinellagranuli，此属种类 在我国未见报道。 BZB．1菌株生长的基本规律和基本条件。颡粒申氏 研究明确了颗粒申氏杆菌Shinellagranuli 杆菌Shinella granuli 生长对氧的需求量不赢，菌体有高浓度发酵生产的潜力。 通过研究还明确了环境医予对BZB一1蘑株降解效率的影响。葙用气相色谱监测底物(阿特拉 1)，隧§玎转拉津浓度升高，其完 BZB一1在3天内即可将其完全晦解(未检出，捡测聚为0．01ng／p 全降解的时间也相应明显延长。接菌量对降解效率有显著影响，随着培养基中接种的菌体浓度的 温度对降解率的影响明嶷，瀚株降解的最适温度为20—35。C，其降解率均大于98．3％，当温度小 于20℃(88．8％)或高于35℃时(89．1％)．菌株的f锋解力玛开媲明显下降。 为了明确菌株降解酶的利用价值，本文研究了降解酶粗酶液的基本特性。通过酶定位实验， 分泌的降解酶为组成型酶，在无底物诱导的牛肉膏蛋白胨培养基}：连续转接培养8代后，该菌对 阿特拉津的降解能力仍保持在较高水平，底物诱导前后该菌对阿特拉律的降解能力无显著变化。 温度对粗酶液降解活性的影响明鼹，降解酶适宜的温度为25—35℃，35℃时粗酶液对阿特拉津的 (组成挚酶)，降解酶对溢度、pt-I的适应范羽较j、‘，对底物的降解效率菇，该降解酶其有较葑的 开发应用潜力。 关键词： 降解菌，阿特拉津，生物降解，除草剂，生物修复 Ⅱ Abstract Astheextensiveuseofatrazineintheworld．ithasbecomeoneoftheworst ofsoilandwater．microbialofatrazineisof interestbecauseofthe pollutants degradation particular high mammalianofsuch andtheir this thesis，theanalyticalmethod， toxicity compoundswidespread．In andcharacterizationofa enrichment，isolation