除草剂氯嘧磺隆微生物降解机制及代谢产物研究.pdfVIP

摘要 摘 要 (乙酯)】是美国杜邦公司于20世纪80年代开发的一种磺酰脲类除草剂。氯嘧磺隆是一种超 高效、广谱的大豆田苗后除草剂，对一年生禾本科杂草、部分阔叶杂草及部分莎草科杂草具 有较好的防治效果。氯嘧磺隆在土壤中残留时间长，并且极低残留量就可以引起后茬敏感作 物的药害，严重影响农业生产中种植结构的调整。微生物能够明显降解除草剂残留，并且对 环境安全、无毒。因此，利用微生物治理此类长残留除草剂的污染，在工农业生产领域中具 有非常重要的意义。本文利用仪器分析和生物化学方法系统的研究了，在不同条件下真菌对 氯嘧磺隆除草剂的降解作用；采用HPLC结合LC．MS对氯嘧磺隆的主要降解产物进行初步鉴 定，明确了氯嘧磺隆除草剂在不同条件下的降解机理和代谢途径。 主要研究结果如下： 1．黑曲霉在基础培养基中最适宜的培养条件：氯嘧磺隆浓度为10．0mg·L1，温度为30．0C， 接种量为5．0mL。 2．不同真菌菌株对氯嘧磺隆的降解速率不同。顺序为：黑曲霉黄曲霉F8。其中，真 菌黑曲霉对氯嘧磺隆的降解率为96．49％，黄曲霉为88．95％，F8为82．37％。 3．混合菌株对氯嘧磺隆的降解速率均高于其单一菌株。顺序为：黑曲霉与黄曲霉混合菌 株黑曲霉与F8混合菌株。两种混合菌株对氯嘧磺隆的降解率均在98．2％以上。 4．在不同真菌菌株的作用下，随着氯嘧磺隆降解率的增加，降解液的pH值逐渐降低。 其中，加入黑曲霉的氯嘧磺隆降解液pH值由最初的7．55降低到3．42：加入黑曲霉与黄曲霉混 合菌株的降解液pH值变化幅度最大，由最初的7．51降低到3．27。 5．氯嘧磺隆的水解和微生物降解产物不同。其中，水解和微生物降解产物均含有产物 A[N，N．二邻甲酸乙酯苯磺酰基尿素]、B【邻甲酸乙酯苯磺酰胺基甲酸酯]、C[邻磺酰胺苯甲酸乙 酯】、D【邻磺酰苯酰亚胺]、G[2一(4一氯一6一甲氧基嘧啶．2．基氨基甲酰氨基磺酰基)苯甲酸]和J【2．(4． 氯．6．甲氧基嘧啶．2．基亚胺醇氨基磺酰基)苯甲酸乙酯】。此外，真菌黑曲霉对氯嘧磺隆的降解 产物还有产物E[2．(氨基磺酰基)苯甲酸】、F[邻甲酸乙酯苯磺酰基异氰酸酯】和H12．氨基．4．氯．6． 甲氧基嘧啶]；真菌黄曲霉对氯嘧磺隆的降解产物还有产物F；真菌黑曲霉与黄曲霉混合菌株 对氯嘧磺隆的降解产物还有产物F和H。 6．氯嘧磺隆的水解和微生物降解机理及代谢途径不同。虽然水解和微生物降解反应都是 苯环上的酯基水解和磺酰脲桥断裂，转化为2一氨基．4．氯．6．甲氧基嘧啶和2．(氨基磺酰基)苯甲 酸乙酯等物质：甲氧基嘧啶环可开环被降解为C02和H20；嘧啶环上甲氧基稳定，没有脱甲 氧基反应发生。但是微生物对氯嘧磺隆的降解机理更为复杂，真菌菌株不仅可以通过分解水 解的产物来促进水解反应的进行，而且可以使生成的裂解产物进一步发生水解、氧化、醇解 和环化反应；其中，黑曲霉、黑曲霉与黄曲霉混合菌株还可以分解氯嘧磺隆的互变异构体， 使分解产率更高。 关键词磺酰脲类除草剂；氯嘧磺隆；微生物降解；高效液相色谱；高效液相色谱．质谱； 降解机制；代谢产物： Abstract Researchonthe mechanismand biodegradation ofherbicide degradation products chlorimuron--ethyl Abstract Chlorimuron—ethyl，ethyl isa herbicidediscoveredand in sulfonylurea DuPont ofUnitedStates developedby campany