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铝诱导柱花草根系分泌柠檬酸及其调控机理的研究 摘要 铝毒是酸性土壤上限制植物生长的最重要的限制因子之一。有机 酸分泌被认为是一些耐铝植物抵御铝毒害的重要机制，但人们对有关 铝胁迫下，植物根系分泌有机酸的调控机制的认识还比较有限。本研 究以柱花草为材料，通过水培试验，比较柱花草热研2号和热研7 号的耐铝性差异及与其根系分泌有机酸，以明确柱花草品种间耐铝性 差异的机制。研究还以耐铝性较强的热研2号品种为材料，在研究了 柱花草根系柠檬酸分泌特点的基础上，进一步从阴离子通道、蛋白质 合成及修饰、有机酸代谢与运输以及细胞信号转导等方面探讨铝诱导 柱花草根系分泌柠檬酸的调控机制。研究结果表明： 后，热研2号相对根伸长率均大于热研7号的伸长率，而根尖被铬天 青R染色较浅，说明热研2号耐铝性较强。在铝胁迫下热研2号根系 分泌柠檬酸的速率显著大于铝较敏感的热研7号品种，且柠檬酸分泌 受阴离子通道抑制剂、蛋白合成抑制剂、呼吸抑制剂抑制时，根尖的 铝含量显著增加，说明了铝诱导根系分泌柠檬酸是柱花草品种间耐铝 性差异的重要机制。 铝胁迫下距根尖0．5．1．Ocm的根段分泌的柠檬酸数量显著高于 要分泌位点。 缺磷也能诱导柱花草根系分泌柠檬酸，在处理后的第6天开始缺 磷处理根系分泌的柠檬酸显著高于对照处理的柠檬酸，并在缺磷处理 后的第8d至第1 0d时达最大并在此后减少，暗示根系分泌柠檬酸并 非柱花草对铝胁迫的专一性反应。 铝诱导柱花草根系柠檬酸的分泌有一个明显的滞缓期，在开始铝 处理的0．5、2、4h根系分泌的柠檬酸很少，而处理8h后分泌量明显 增加，说明柱花草以第二类模式分泌有机酸。 10}tmol 均抑制铝诱导的柠檬酸分泌。其次，在铝溶液中加入的蛋白合成抑制 制柠檬酸分泌。此外，呼吸抑制剂(NaN3)、柠檬酸载体抑制剂(PITC) 也显著抑制铝诱导的柠檬酸分泌。另一方面，铝处理溶液中的异三聚 G蛋白激活剂(CTX)使根尖细胞内的游离钙信号加强并促进柠檬 酸的分泌，而加入G蛋白抑制剂(PTX)削弱钙信号强度并抑制柠 檬酸的分泌。这些结果说明：(1)阴离子通道介导铝诱导柱花草根系 柠檬酸分泌，且柠檬酸的分泌需新合成蛋白的参与；(2)在铝胁迫下 根尖的呼吸作用及柠檬酸在线粒体膜上的跨膜运输影晌着根系柠檬 酸的分泌；(3)异三聚体G蛋白介导铝胁迫的信号转导，并参与铝 诱导柱花草根系分泌柠檬酸的调控过程。 关键词：铝柱花草柠檬酸分泌调控机制 n ASTUDYON SECRETIoNOF ALUMINUM．INDUCED CITRATEFROMTHEROOTSOF SPPAND Stylosanthes CORRESPoNDMECHANISM ABSTRACT oneofthemost factors plant Aluminum(A1)isimportantlimitinggrowth it thatAI—inducedsecretionof inacid hasbeenconsidered soils．Although acidsfromrootsisamainmechanismforsomeAI-tolerance organic plants,SO farthe aboutthemechanismsforAl-inducedsecretionof knowledge responsible acidsisstill limited．In