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神农霉素ⅱ号组高产菌株育种与发酵工艺研究
神农霉素II号组分高产菌株育种与发酵工艺研究
研究生 裴朝玉 导师 林开春
摘 要
vaF.
神农霉素产生菌是吸水链霉菌应城变种(Streptomyceshygroscopicus
et
yingchengens括Yan
植物真菌病害的新农用抗生素。
本文对神农霉素II号组分进行了化学定量方法的研究。结果表明用HFLC
法分析时,标准品的浓度在21.2u
g/m1—846.0u
g/ml范围内分析结果有较好的
线性关系。其相关系数、变异系数、回收率分别为0.99947、0.108%、
97.60—100.23%。
运用六种诱变育种方法对神农霉素产生菌进行诱变处理,筛选高产菌株。通
过HPLC法测定效价,最后得到一株活性是原始菌株4.0倍的诱变株H一191一卜1,
u
效价为212.4
g/ml(原始菌株Z009,效价为53.7IJ,g/m1)。通过对各种育种方
法的比较得到:紫外线、微波、N+离子注入对神农霉素产生菌诱变效果相对较好。
对高产菌株D.81—7进行了摇瓶发酵培养基筛选和最佳发酵条件的研究。对
培养基配方进行了单因子实验,筛选出最佳的碳源和氮源。对培养基各组成成分
进行了正交实验,找到最佳配比。还对pH、温度、无机盐、摇瓶装量等发酵工
艺条件分别进行了探索。得出最佳培养基配方为:玉米淀粉6%鱼粉1.8%黄
0.1% NaCl
豆饼粉0.8%KH2P04 0.15%CaC03
0.4%。消前pH7.3—7.5,
温度28—30。C,摇瓶装量30ml/150ml,发酵效价最高。通过发酵罐发酵实验得到:
在我所做实验条件下发酵效价与生物量没有明显的相关性;发酵效价与发酵时
间、氨基氮、还原糖,总氮、总糖有显著的相关性。优化发酵培养基的发酵效价
是原发酵培养基的120.1%。
关键词:抗真菌剂神农霉素II号组分:定量分析;育种:发酵工艺;优选
on of
the strainsand
Study high
breedingproduction
fermentationof II
shennongmycin
Pei kaichunLin
postgraduatechaoyu supervisor
Abstract
strainis a mutantof
Shennongmyein
producing
YanetRuan.n.var).Itisanew
hygroscopicusvar.yingchengensis agricultural
antibiotic of of
showingmultiple
activityinhibitingfungi
plant.
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