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精氨酸对乳腺上细胞中酪蛋白合成的影响及其调控机制
II
—
mg/L)、8倍组(2224.00
内QS、D一酪蛋白合成量进行测定。结果显示:对于Qs一酪蛋白,除了Arg0.25倍组与
Arg8倍组,各处理组与对照组相比差异显著(P0.05),且在Arg2倍组时Qs一酪蛋白
的合成量达到最大;对于B一酪蛋白,除了Arg0.25倍组,各个处理组与对照组相比差异
显著(P0.05),且在Arg2倍组时B一酪蛋白的合成量达到最大。
试验三精氨酸对乳腺上皮细胞生长及增殖的影响
该试验以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究培养基中不同水平的Arg对奶
牛乳腺上皮细胞生长以及细胞增殖活性的影响。试验设计同试验二。采用台盼蓝计数法绘
h、48h、
制不同处理组的细胞生长曲线,采用噻唑蓝(MTT)法分别检测各个处理组的24
72
h的细胞增殖活性。结果显示,各个处理组的细胞生长曲线均呈S形,在第三天达到
2倍组的细胞数目高于其他各组;MTT结
指数期,第七天进入平台期,进入平台期后Arg
果显示,24h时,Arg
Arg各组与对照组相比均差异显著(P0.05)。说明精氨酸能促进乳腺上皮细胞的增殖,
且在Arg浓度为69.50—1112.00mg/L(0.25倍组一4倍组)时促增殖效果较佳。
试验四精氨酸对乳腺上皮细胞内酪蛋白合成以及信号转导相关基因表达的影响
该试验以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究培养基中不同水平的Arg对奶
表达的影响。试验设计同试验二。以GAPDH为内参,采用Real-TimePCR技术检测各个
表达量。结果显示:对于CSNlS2、CSN2、JAK2基因,除了Arg0.25倍组与Arg8倍组
了Arg
了Arg
基因,除了Arg0.25倍组外,其他各各处理组与对照组相比显著下调其表达(P0.05);
在Arg
mg/L
从而促进乳蛋白基因的表达,当体外细胞培养液中Arg浓度为556mg/L时,JAK2、STAT5、
mTOR、S6K基因的表达均上调,而4EBPl基因表达显著下调。
关键词: 精氨酸;奶牛乳腺上皮细胞;酪蛋白合成;调控机制·
of tomilkcasein andits
arginine synthesis
Responses
from
mechanismin cells
manipulating mammaryepithelial
COW
Lactating
Bolin
Postgraduate:Xu
Adivisor:Prof.WangHongrong
Scienceand
ofAnimal Technology,YangzhouUniversity,225009
College
Abstract
this cellofHolstein
In experiment,themammaryepithelial lactating
theeffectsofdifferentconcentrationsoncasein and
usedforthemodeltoassay
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