猪链球菌分泌蛋白的免疫蛋白质组学研究.pdfVIP

生望婆鱼堑兰苤查!!堕至!旦箜!!鲞笙!塑垦!堡』圣2111翌型!坚!竺垒!!塑!∑!!：!!!基!：! ·267· ·实验室研究· 猪链球菌分泌蛋白的免疫蛋白质组学研究 孙强正 罗霞 叶长芸 肖迪 郑翰 景怀琦 徐建国 【摘要】 目的寻找猪链球菌(s．s“曲)sc84菌株分泌蛋白中具有抗原活性的蛋白，为s．s“is特 异诊断抗原和新的疫苗候选抗原的筛选提供线索。方法 采用免疫蛋白质组学和介质辅助激光解吸 电离飞行时问质谱(MALDI—ToFMS)技术，分析和鉴定S．s“西SI盈4菌株分泌蛋白中能与感染病例恢 复期血清发生免疫杂交的蛋白点。结果 在s．s“isSc84菌株分泌蛋白的免疫杂交膜上，共发现14 个具有抗原活性的蛋白点，其中11个点可以在考马斯蓝染色胶上找到匹配点。11个蛋白点经质谱 鉴定，分属于8种蛋白，全部定位于胞壁或胞外。其中溶菌酶释放蛋白、溶血素、细胞外因子为S．s“如 已知的抗原蛋白；5’一核苷酸酶、ribonucleasesG和E、金属内肽酶等为新发现的具有抗原活性的蛋白； 所有的蛋白均能在测序菌株S．5“is05ZYH33基因组中找到相应的编码基因。结论在S．s“曲分泌蛋 白中发现了新的具有抗原活性的蛋白，可能作为S．s“妇特异诊断抗原和疫苗候选抗原，用于诊断试剂 和疫苗的研究。 【关键词】猪链球菌；分泌蛋白；免疫蛋白质组学 of secretive strainSC84S己订V Immunoprotemic勰saypmtei璐from研repfocD0似ssH括type2 Q缸行g- 咖册g+，LUoX缸，yEC妇竹g-3w咒，X似ODi，ZHENGH口咒，JfNGH“盘i一砸，XUJ缸”一g“o．’S￡n地K纠 №￡io卵盘Z Dis阳sP L口￡}。r口￡orv加rJ花，砬≠io“sDis臼6uPP理z柁挖zio托n弛d(b挖￡，·oZ， J”s￡i￡乱￡8加r(为7咒7挖“竹2c口6ZP GD72￡r0Z口挖d Dis∞58(力，2￡roZn咒d P地伽以￡io竹，C“咒E靶G嘲地r加r P愆伽咒￡io咒，B耐ii咒．g102206，China CDr，。已s声。咒di咒gn甜f^or：XU．，i口竹一g“o，Ema订：xujg(茧public．bta．net．cn Tb secreted 【Abstract】0bjectiveidentifyantigenicproteins byS￡，℃pfo∞ff秕ss“is(S．s“is)type2 strainSC84．TuethodsTwo—dimensionalelectrophoresis(2．DE)，western—blotassayandmatrix—assisted laser of were to deSorption／ionization～timefli曲t·massspectrometry(MALDI—TOF—MS)analySisperfomed searchand secretedS．5“isstrain anoutbreakofthe identifyantigenicproteins by SC舄4，whichtriggered Atotalnumberof14westernblot werefound diseaseinSichuanprovince，China，in2005．Results spots onPVDFmembrane．11 whichcouldbefoundtheexistenceof oncoomassieG．250— spots