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甘露糖结合蛋白基因多态性与肺结核发病关系的研究.pdf
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·实验研究·
钩端螺旋体主要属特异性蛋白抗原分布
及其免疫性研究
孙百莉 罗冬娇孙军德 严杰
【摘要】 目的确定致病性问号钩端螺旋体(钩体)属特异性外膜蛋白的抗原性和交叉免疫反应
性，为研制通用性钩体基因工程疫苗及检测试剂盒提供依据。方法采用Ni—NTA亲和层析法，提取
rLipL41／2、rompLl／1和rompLl／2，并用sDSPAGE检测表达及提纯效果。上述重组蛋白常规皮下
免疫家兔获得抗血清，显微镜凝集试验(MAT)检测各抗血清交叉凝集效价。采用盐变法提取了我国
15群问号钩体参考标准株及非致病的双曲钩体PatocI株的外膜蛋白。以兔抗血清为一抗，采用
western
blot检测上述4种外膜蛋白自然表达情况及其免疫反应性。结果
rLipL21、r“pL32／1和
和35％、15％和10％、30％和15％，各重组蛋白SDSPAGE提纯后均仅见单一的蛋白条带。重组蛋
白兔抗血清在同一基因不同基因型表达产物之间有广泛的交叉免疫反应性，与不同钩体血清群的
MAT效价为1：2～1：128。各血清群钩体外膜中均可检出上述4种外膜蛋白，但LipL21仅存在于问
号钩体中。结论LipL2l、LipL32、LipL4l、0mpLl均为钩体属特异性表面抗原，可作为通用性钩体
疫苗及检测试剂盒的候选抗原。
【关键词】问号钩端螺旋体；外膜蛋白；属特异性抗原；交叉凝集；免疫性鉴定
of thedis订ibutionof
Study蚰thei姗unogenicitymajorlept帼piralgen鹏一specificprotein明tige璐aⅡd
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China＆r懈加咒di增n甜娩or：Ⅵ州胁，Email：Med—bp@zju．edu．cn
of
【Abslract】 Thedeteminatjon and
objecljVe antigenicityimmunogenicityof匕彬D眵i阳
outer willofferevidencefor
(0EPs) universal
i咒匏rro：gu咒sgenus—specificenvelopeproteins developing
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chromatographypurify productsrLipL2l，rompLl／1，rC
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