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猪链球菌2型反应调控因子RevS突变株的构建.pdf
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·实验室研究·
猪链球菌2型反应调控因子R已刁S
突变株的构建
鞠爱萍王长军 李明 程功 郑峰潘秀珍陆承平唐家琪
【摘要】 目的 构建猪链球菌2刊强毒株05zYm3反应渊控因子R。s基因敲除突变体，研究
基因敲除后对细菌基本生物学性状投对小鼠和猪的致病降的影响。方；去构建中间为壮观霉索抗性
基因，两侧为Re”s编码基因上、下游同源序列的基幽敲除裁体，通过同源重组和PCR法鉴定，获得
Re。5编码基因完全被壮观霉素抗降基幽替代的突生株。体外观察基凶敲除后细菌的稳定性、牛长曲
线、茼落形态、溶血件、染色情况、镜下彤忐及蛋白表达等基本生物学性状有无发牛明显改变。以
l(户cFu野毒株和缺先株分别感染BALBk小鼠和20日龄仟猪．观察致病忡有允明品区别。结果
I，(：R分析显示Re硌编码基因完全被壮观霉素抗性基因替代，丛凶敲除后细菌的基本生物学眭状尤
明显改变。动物感染实验显示，R删s缺失株对小鼠的致病件显著减弱，但对其主要宿主猪的致病性
未见显著改变。结论成功构建了猪链球菌2型强毒株05zYH33反应调控斟子R稍基崮敲除突
变株．基因敲除后末明显影响细酶的基奉生物学性状，但对小鼠和猪的致病性有所减弱。
【关键词】猪链球菌2型；反应调控因子；基因敲除；致病件
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【Abstract】0bjec廿ve gcnc re印onseregulator
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