SA、MeJA、ACC和苹果轮纹病病原菌诱导湖北海棠MhWRKY1基因的表达.pdfVIP

中国农业科学 2011,44(5):990-999 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.05.016 SA、MeJA、ACC和苹果轮纹病病原菌 诱导湖北海棠MhWRKY1基因的表达 张计育，佟兆国，高志红，罗昌国，渠慎春，章 镇 (南京农业大学园艺学院，南京 210095) 摘要：【目的】从湖北海棠叶片中克隆MhWRKY1转录因子的全长cDNA序列，分析该基因在各种组织中（叶、 茎、根）的表达特性，并分析 SA、MeJA、ACC 在叶、茎、根中诱导 MhWRKY1 基因的表达模式以及苹果轮纹病病原 菌诱导条件下湖北海棠叶片中该基因的表达特性。【方法】利用电子克隆技术和RT-PCR验证相结合的方法，从SA 诱导的湖北海棠全长cDNA文库中，克隆MhWRKY1转录因子的全长序列；利用生物信息学的方法对其进行结构和功 能的初步分析；利用实时荧光定量RT-PCR 技术分析该基因在不同组织中的表达以及在SA、MeJA、ACC和苹果轮纹 病病原菌诱导下的表达特性。【结果】克隆了 MhWRKY1 基因的全长 cDNA 序列为 1 338 bp，GenBank 数据库登录号 为FJ598139。生物信息学分析表明，该基因最大开放阅读框为993 bp，编码330个氨基酸。推导的氨基酸序列与 杨树 WRKY26、杨树 WRKY20、大豆 WRKY，马铃薯 WRKY2、烟草 WRKY、拟南芥 WRKY7、水稻 WRKY53 的同源性分别为 68%、68%、66%、60%，59%，49%和 43%。该转录因子含有 1 个 WRKY 结构域，其 N 端含有 1 个 WRKYGQK 结构域，C 端含有1个C2H2锌脂结构，属于第Ⅱ类型的转录因子。表达分析结果表明，MhWRKY1 在叶和茎中的表达量较大， 分别是根的 4.81 和 3.75 倍。在湖北海棠叶、茎、根中，SA、MeJA、ACC 都可以诱导该基因的表达。另外，在所 研究的72 h内，苹果轮纹病病原菌可以诱导该基因表达，且表达量在12 h达到最大，是未处理之前的9倍左右。 【结论】MhWRKY1 转录因子可能参与 SA、MeJA 和 ET 介导的植物抗病防卫反应的基本信号通路，并且参与对苹果 轮纹病病原菌引起的防卫反应，在湖北海棠的的抗病过程中可能起着非常重要的作用。 关键词：湖北海棠；MhWRKY1；表达特性；SA；MeJA；ACC；苹果轮纹病病原菌 Expression of MhWRKY1 Gene Induced by the Elicitors SA, MeJA, ACC and the Apple Ring Spot Pathogen ZHANG Ji-yu, TONG Zhao-guo, GAO Zhi-hong , LUO Chang-guo，QU Shen-chun, ZHANG Zhen (College of Horticulture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095) Abstract: 【Objective 】This study aimed to clone a full length cDNA of MhWRKY1 from Malus hupehensis and analyze the expression pattern of MhWRKY1 in different tissues (leaf, stem and root) and the expression pattern after treatment with the elicitors salicylic acid (SA), methyl jasmonate (MeJA), 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) a