产蛋前期和产蛋期籽鹅组织内参基因的稳定性.pdfVIP

中国农业科学 2012,45(11):2260-2266 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.11.015 产蛋前期和产蛋期籽鹅组织内参基因的稳定性 1 1 2 2 1 1 计 红 , 王忠伟 , 郭景茹 , 王建发 , 赫荣贺 , 杨焕民 1 2 （黑龙江八一农垦大学动物科技学院，黑龙江大庆163319； 吉林大学畜牧兽医学院，长春130062） 摘要：【目的】分析比较使用广泛的7 个候选内参基因在产蛋前期和产蛋期籽鹅组织中的表达情况，筛选籽 鹅组织基因表达分析中最佳的内参基因及其数目。【方法】应用实时定量反转录 PCR 技术，分别检测 28S rRNA、 18S rRNA、GAPDH、ACTB、HPRT1、SDH 和TUB 在产蛋前期与产蛋期健康籽鹅肝脏、肾脏、心脏、腿肌和卵巢组织 中的表达情况，采用绝对定量方法确定基因拷贝数，然后分别使用geNorm 和NormFinder 程序进行数据分析。【结 果】产蛋前期籽鹅各组织中7 个内参基因表达稳定度的顺序分别为：GAPDH=HRPT1 （0.195）＞TUB （0.244）＞28S rRNA （0.414）＞18S rRNA （0.495）＞ACTB （0.541）＞SDH （0.610）；产蛋期籽鹅各组织中7 个内参基因表达稳定 度的顺序分别为：GAPDH=28S rRNA （0.128）＞TUB （0.181）＞ACTB （0.192）＞SDH （0.221）＞HRPT1 （0.316）＞ 18S rRNA （0.362），且7 个基因的配对差异分析分别为V2/3 （产蛋前期）=0.084、V2/3 （产蛋期）=0.069，内 参基因的最适数目均为2 个。【结论】产蛋前期和产蛋期籽鹅组织目的基因的表达分析中相对适合的内参基因分别 为GAPDH 和HRPT1、GAPDH 和28S rRNA。 关键词：籽鹅; 内参基因; 实时定量反转录PCR; geNorm 程序; NormFinder 程序 Stability of Endogenous Reference Genes in Green-Goose Tissues During Prelaying and Laying Periods 1 1 2 2 1 1 JI Hong , WANG Zhong-wei , GUO Jing-ru , WANG Jian-fa , HE Rong-he , YANG Huan-min 1 ( College of Animal Science and Veterinary Medicine, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319, Heilongjiang ; 2College of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062) Abstract : 【Objective 】 The mRNA expression levels of seven candidate reference genes in green-goose tissues during prelaying and l