大足黑山羊卵泡抑素cDNA的克隆、序列分析及组织表达.pdfVIP

中国农业科学 2011,44(22):4700-4705 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.22.018 大足黑山羊卵泡抑素cDNA 的克隆、 序列分析及组织表达 1 1 1 2 1 罗艳梅 , 张 超 , 赵中权 , 范景胜 , 张家骅 1 2 （西南大学重庆市牧草与草食家畜重点实验室，重庆 400716 ； 四川省畜牧科学研究院，成都 610066 ） 摘要：【目的】旨在克隆大足黑山羊卵泡抑素（follistatin）的基因序列，并研究其在不同组织中的表达差 异。【方法】采用RT-PCR 方法从大足黑山羊卵巢组织总RNA 中克隆出follistatin 的cDNA 序列，用相关软件进行 序列分析，并利用real-time PCR 技术检测follistatin 基因在不同组织中的表达。【结果】序列分析表明，大足 黑山羊follistatin 的cDNA 序列全长为1 217 bp，包括该基因完整的开放阅读框（open reading frame，ORF） 1 035 bp，编码344 个氨基酸。与牛的核苷酸序列比对同源性高达98%。real-time PCR 结果表明，follistatin 基因能在心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体中检测出来，在肾脏中表达量相对较高，在垂体中表达量较 低。肾脏中follistatin mRNA 含量显著高于垂体中follistatin mRNA 含量（P＜0.05）；心脏中follistatin mRNA 含量显著高于垂体中follistatin mRNA 含量（P＜0.05）；其余各组织间follistatin mRNA 含量差异均不显著（P＞0.05）。 【结论】成功克隆出大足黑山羊follistatin 基因cDNA 序列，该基因在肾脏中的表达高于其它组织。 关键词：follistatin; 荧光定量; RT-PCR ; 组织表达; 大足黑山羊 Molecular Cloning, Sequence Analysis and Tissue Expression of Follistatin Gene in Dazu Black Goat 1 1 1 2 1 LUO Yan-mei , ZHANG Chao , ZHAO Zhong-quan , FAN Jing-sheng , ZHANG Jia-hua 1 ( Chongqing Key Laboratory of Forage and Herbivore, Southwest University, Chongqing 400716; 2Sichuan Animal Science Academy, Chengdu 610066) Abstract: 【Objective 】 The objective of this experiment is to clone the sequence of Dazu black goat follistatin gene and explore the expression levels of folli