防治蓟马的球孢白僵菌SDDZ-9菌株液体发酵工艺优化.pdfVIP

中国农业科学 2015,48(15):2985-2994 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.15.008 防治蓟马的球孢白僵菌SDDZ-9菌株液体发酵工艺优化 1 1 2 1 1 张璐璐 ，吴圣勇 ，王帅宇 ，李 娟 ，雷仲仁 1 2 （中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100193 ； 北京市植物保护站，北京 100029 ） 摘要：【目的】球孢白僵菌( Beauveria bassiana)作为一种重要的虫生真菌，已广泛应用于害虫生物防治， 但其不成熟的规模化生产技术一直是限制球孢白僵菌广泛应用的主要问题之一。开展球孢白僵菌液体发酵工艺研 究，提高液体发酵生物量，从而为固体发酵阶段提供优质的种子液，进而提高固体发酵的产孢量，为球孢白僵菌 规模化生产提供参考。【方法】影响球孢白僵菌液体发酵的培养条件有温度、装样量、摇床转速、接种浓度和 pH 等，首先采用Plackett-Burman试验设计，筛选出影响球孢白僵菌菌株SDDZ-9的液体发酵的主要因子，然后运用 最陡爬坡路径法，以试验值变化的梯度方向和各因素效应值的大小分别确定爬坡方向和变化步长，确定响应面的 中心点，逼近最佳值区域，最后采用central composite design (CCD)响应曲面法，建立多元二次回归方程来拟 合各因素与效应值之间的关系，并对影响发酵生物量的各因素及其交互作用进行响应面分析和评价，确定对西花 蓟马(Frankliniella occidentalis)毒力较高的球孢白僵菌菌株 SDDZ-9 液体发酵的最优培养条件。【结果】培养 温度、装样量、转速和浓度是影响发酵生物量的主要因子，一定范围内的pH变化对此菌株的液体发酵影响较小。 在自然pH下，当培养温度27.08℃、装样49.72 mL（250 mL 三角瓶）、摇床转速205.45 r/min、接种浓度1.122 7 ×10孢子/mL时，发酵48 h 产生的生物量最大。在优化发酵条件下进行液固双相发酵试验，得到的球孢白僵菌液 体发酵生物量为 14.769 g·L-1 -1 11 ，与模型预测生物量相符，固体发酵后产孢量为 20.16 g·kg ，含孢量 1.84×10 孢 子/g。【结论】在优化发酵工艺条件下进行发酵，可显著提高球孢白僵菌的产孢量，此液体发酵工艺为球孢白僵菌 的规模化生产奠定了基础。 关键词：球孢白僵菌；响应曲面法；发酵条件；优化 Optimization of Fermentation Process of Beauveria bassiana of SDDZ-9 Against Frankliniella occidentalis 1 1 2 1 1 ZHANG Lu-lu , WU Sheng-yong , WANG Shuai-yu , LI Juan , LEI Zhong-ren 1 ( State Key Laboratory for Biology of Plant