橘小实蝇幼虫解毒酶系基因应对高效氯氰菊酯胁迫的组织特异性表达.pdfVIP

中国农业科学 2015,48(19):3857-3865 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.19.008 橘小实蝇幼虫解毒酶系基因应对高效氯氰菊酯 胁迫的组织特异性表达 1 2 1 1 1 申光茂 ，王晓娜 ，黄 勇 ，豆 威 ，王进军 1 2 （西南大学植物保护学院/ 昆虫学及害虫控制工程重庆市市级重点实验室，重庆 400715 ； 重庆市花卉园管理处，重庆 401147 ） 摘要：【目的】基于橘小实蝇（ Bactrocera dorsalis ）转录组数据，系统分析橘小实蝇幼虫解毒代谢酶系基 因在受到高效氯氰菊酯持续胁迫时的表达模式，鉴定其中起主要作用的基因，并探讨这些基因组织差异表达的生 物学意义。【方法】利用qPCR 技术检测橘小实蝇幼虫受到高效氯氰菊酯持续胁迫后，30个解毒代谢酶系（GSTs、 P450s、CCEs）基因在整虫、中肠以及脂肪体的表达水平变化情况。【结果】在高效氯氰菊酯持续胁迫作用下，橘 小实蝇 8 个 GSTs 基因中，其 mRNA 表达量出现明显上调的主要是 Delta 家族的 4 个基因，它们在中肠和脂肪体均 出现了5.6—32.5倍的过量表达，而其他家族的GSTs基因经高效氯氰菊酯胁迫后没有出现明显的应激反应。同时， Delta家族的GSTs基因虽然在中肠和脂肪体对药剂胁迫有积极的响应，但是它们的表达在整虫却没有明显的变化。 6 个 CCEs 基因在整虫中出现一定程度的上调，其中α-E3 基因的表达量上调了 4.1 倍，但是这些基因在中肠和脂 肪体均没有出现上调的情况。16 个 P450s 基因的定量分析结果表明，有多个 P450s 基因的 mRNA 的表达出现了上 调，且大部分基因属于CYP4 和CYP6两个家族。其中，CYP4家族中出现明显上调反应的主要有 CYP4D47 （中肠）、 CYP4E9 （整虫、脂肪体）和CYP4P5 （整虫、脂肪体）。CYP4AD1 的表达量在中肠和脂肪体均有一定程度的上调，而 在整虫中没有变化。另外， CYP4S18 和 CYP4AC4 没有出现应激表达或者表达量的变化不明显。CYP6家族中，CYP6A48 和 CYP6A41 在脂肪体的表达量显著上调，分别提高了 18.0 和 9.6 倍，CYP6G6 和 CYP6A50 在脂肪体的表达量也有 一定程度的上升，而 CYP6EK1 的表达量虽然在整虫提高了 4.8 倍，但是在中肠和脂肪体并没有明显的变化。其他 家族的 P450s 基因，如 CYP12C2、CYP9F6、CYP12N1 和 CYP309B1 等基因的表达量经高效氯氰菊酯胁迫后在脂肪体 中也出现了显著的上调，而 CYP317B1 的表达量在药剂压力下并没有明显的变化。【结论】橘小实蝇幼虫在应对高 效氯氰菊酯胁迫时，体内的解毒代谢酶系基因集中在中肠和脂肪体高水平表达，但存在整体保持平衡的现象，推 测橘小实蝇在应对杀虫剂的持续胁迫时，存在趋于平衡的能量分配策略，即通过提高能量的利用效率，减少在抵 御外源杀虫剂伤害时额外能量的消耗。这种可以避免出现适合度代价的策略可能是昆虫应对环境压力的一种重要 适应机制。 关键词：橘小实蝇；GSTs；P450s；CCEs；药剂胁迫；组织特异性 Tissue Specific Expression of Genes Encoding Detoxification Enzymes in the Larvae of Bactrocera dorsalis