实习一白细胞分类摘要.pptVIP

实验实习一 白 细 胞 分 类 实习内容和要求 了解显微镜的使用方法 掌握血涂片制作、染色 掌握白细胞分类方法 掌握周围血液中五种正常白细胞形态，白细胞总数和分类的正常值及临床意义 生物显微镜的使用方法（复习） 准备工作： 将显微镜的工作台擦干净 将要观察的标本和各种器具准备好 取用： 一手握镜臂，一手托底座 放在离工作台边缘8－10厘米处，偏左的位置 目镜10×，物镜10×、40×、100× 显微镜的总放大倍数＝目镜的放大倍数×物镜放大倍数的乘积 对光： 双目显微镜：调节双目镜宽度，直到在两个目镜上双眼同时观察时，两个图形的视场正好完全重合 逆时针转动转换器使10×物镜对准载物台中央的通光孔 转动粗调焦器，把镜筒向上提起。转动旋转器，使低倍接物镜对准载物台的圆孔。二者相距约2cm左右，打开光源按钮，向前向后移动按钮，两眼对着目镜观察，调节光线的强弱至适宜强度 根据物镜的放大倍数调节聚光镜的高度－－使用油镜时由于放大倍数大，镜像亮度小，需要较强的照明－将聚光镜升至最高处 低倍镜的使用 将标本放置在载物台上，用玻片夹固定，使标本对准通光孔正中 俯首侧视接物镜，并顺时针方向旋动粗调焦螺旋，升高载物台，使载物台上升到玻片与接物镜约0.5厘米处－－不能碰到玻片 从目镜观察，并逆时针方向慢慢地转动粗调焦螺旋，使载物台下降至能见到物像为止 调节细调焦螺旋至物像清晰 高倍镜的观察 在低倍镜下，找到要进一步观察的部位，移至视野中心 转动转换器，换高倍物镜 转动细调焦器，上下调节，使物像达到最清晰为止 合格的显微镜操作距离是由低倍镜转换到高倍镜时刚好合用的，一般稍为调节一下细准焦螺旋即可看到清晰的物像 一定是在低倍镜下能看清物像的前提下进行 油镜的观察 在高倍镜下看到标本后，把需进一步放大的部位移至视野中心 下降载物台约1.5厘米 将物镜转离光轴，在盖玻片所要观察的部位上滴一滴香柏油，把光阑升至最大 换上油镜，小心调节粗准焦螺旋，慢慢上升载物台，从侧面观察油镜下端与标本之间的距离，当油镜的下端开始触及油滴时即可停止 从目镜观察，调节细准焦螺旋，直至看清标本物像 观察完毕，下降载物台，将油镜转离光轴，用干的擦鏡纸轻轻地吸掉油镜和盖玻片上的油，再用浸湿二甲苯的擦鏡纸擦拭两三次，最后用干净的擦鏡纸再擦拭两三次 注意事项 禁止单手提取 禁止拆散显微镜上任何部件 镜检时－－坐姿端正、自然、舒适，双目同时睁开观察 镜检顺序－－必须是低倍－高倍－油浸镜 低倍镜检时必须一边俯侧观察载物台上升一边转动粗调螺旋，然后才能在目镜中观察降低载物台找物像 用高倍镜和油浸镜时，绝不能转动粗调螺旋 观察带有水或其他药液的标本，一定要加上盖玻片，并用滤纸吸去盖玻片周围溢出的水或药液，以免接触腐蚀显微镜 显微镜各部分必须保持清洁 光学系统部分－－必须用擦镜纸轻轻揩擦，若镜头等光学部分积有灰尘时需先用洗耳球吸去灰尘后再擦拭，必要时可略蘸些二甲苯进行揩擦 金属等机械部分－－可用纱布擦拭 显微镜用毕后，必须把接物镜移开－－两个高、低倍接物镜以“八”字形朝前方，然后取出装片 拔掉电源，放回原位，罩好防护罩。最后要按仪器使用情况登记本如实填写该仪器使用情况 　　－－加强责任心，养成爱护仪器的习惯，严格操作规程 血涂片制备方法 手工推片法 薄血膜法 1）采血： 选择耳垂边缘或手指肚，先用75%酒精棉球消毒局部皮肤。等待干后，用消毒后的刺血针刺入皮肤，深约 2 毫米。待血液从针孔流出，用干棉花擦去第一滴血 轻轻挤压，使血液流出形成绿豆大小的血滴 取血1小滴（15-20?l），置载玻片的一端1.5cm处或整片的3/4端 2）制备血涂片： 左手持平载玻片，右手持推片接近血滴，使血液沿推片边缘展开适当的宽度 推片与载玻片呈30°～45°，匀速、平稳地向前移动推制成血涂片 3）干燥：－－迅速干燥，天气寒冷或潮湿时可置于37℃温箱中保温促干 标记：在载玻片一端用记号笔编号－－良好的血涂片是血液形态学检查的前提 注意事项 玻片：保持中性、洁净、无油腻 制备血涂片： 血涂片外观应头、体、尾分明，分布均匀，边缘整齐，两侧留有空隙 血膜外观应厚薄适宜 血膜厚度、长度与血滴的大小、推片与玻片之间的角度、推片时的速度及血细胞比容有关 一般血滴大、角度大、推片速度快则血膜厚；反之，则血膜薄 血细胞比容高于正常时，血液黏度较高，宜保持较小的角度；相反，血细胞比容低于正常时，血液较稀，则应用较大的角度和较快的推片速度 良好的血涂片的“标准”为血膜由厚到薄逐渐过度 血涂片染色 目的：使细胞的主要结构，如细胞膜、细胞质、细胞核等染上不同的颜色，以便于镜下观察识别 过程：固定和染色 固定：是将细胞蛋白质和多糖等成分迅速交联凝固，以保持细胞原有形态结构不发生变化 染色：常用的染色方法 瑞特（Wright）染色