甜菜夜蛾触角气味受体基因OR18的克隆和表达定位.pdfVIP

中国农业科学 2013,46(20):4263-4271 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.20.009 甜菜夜蛾触角气味受体基因OR18 的克隆和表达定位 1,2 2 1,2 2 1 刘程程 ，刘 杨 ，张 进 ，王桂荣 ，董双林 1 2 （南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室，南京210095 ； 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学 国家重点实验室，北京100193） 摘要：【目的】从甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）成虫触角中克隆气味受体基因，研究受体基因在虫体不同 组织和触角不同感受器中的表达分布，从而探讨受体基因的功能。【方法】通过PCR 结合RACE 技术克隆气味受体 基因的全长序列，利用实时定量PCR 检测其在不同组织中的表达，采用原位杂交确定其在触角不同感受器中的分 布。【结果】通过同源克隆的方法从甜菜夜蛾触角中获得1 条740 bp 的基因片段，通过RACE 技术获得全长序列并 命名为SexiOR18 （GenBank 登录号JN873314）。SexiOR18 cDNA 全长1 618 bp，开放阅读框长度为1 194 bp，编 码398 个氨基酸。序列比对和进化树分析结果显示SexiOR18 与其它鳞翅目昆虫尤其是夜蛾科昆虫的OR18 具有很 高的相似性。实时定量PCR 检测结果显示，SexiOR18 主要在成虫触角中表达，且在雌虫中的表达量显著高于雄虫， SexiOR18 在成虫其它组织和幼虫触角中无明显表达。原位杂交结果显示，SexiOR18 主要在毛形感器和锥形感器下 表达，而在腔锥形感器和刺形感器下没有表达。【结论】SexiOR18 在感受性信息素和普通气味的毛型感器和锥形 感器中都有分布，推测其可能参与了性信息素和普通气味分子的识别。 关键词：甜菜夜蛾；触角；感受器；气味受体；实时定量PCR；原位杂交 Cloning and Localization of an Odorant Receptor Gene OR18 in the Antenna of Spodoptera exigua 1,2 2 1,2 2 1 LIU Cheng-cheng , LIU Yang , ZHANG Jin , WANG Gui-rong , DONG Shuang-lin 1 ( Education Ministry Key Laboratory of Integrated Management of Crop Disease and Pests, College of Plant Protection, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095; 2State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193) Abstract: 【Objective 】 The objective of this study