香蕉枯萎病菌1号和4号生理小种的快速检测与鉴定.pdfVIP

中国农业科学 2012,45(19):3971-3979 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.19.008 香蕉枯萎病菌1号和4号生理小种的快速检测与鉴定 1 1,2 1 1 1 1 李敏慧 ，余雄涛 ，王鸿飞 ，周佳暖 ，习平根 ，姜子德 1 2 （华南农业大学资源环境学院，广州 510640 ； 广东粤微食用菌技术有限公司, 广州 510663 ） 摘要：【目的】从香蕉枯萎病菌１号和４号生理小种特有的基因序列入手，建立一种快速可靠的分子检测技 术，为防止香蕉枯萎病的传播蔓延、尽早采取防治对策、指导香蕉生产进行品种配置提供理论依据。【方法】 根据研究室已经筛选到的 4 号生理小种候选致病相关基因序列设计引物，分别以来自海南、广东和广西的 6 个香 蕉枯萎病菌1 号生理小种菌株、7个4号生理小种菌株、7个尖镰孢其它专化型菌株以及2个外围菌株DNA为模板 进行PCR扩增，筛选香蕉枯萎病菌1号、4 号生理小种特异性引物及尖镰孢菌的通用引物。【结果】筛选到的特异 性引物不仅可用于香蕉枯萎病菌DNA的检测，还可直接用于对罹病香蕉组织和土壤中的香蕉枯萎病菌的检测； 筛选到的尖镰孢菌通用引物，可作为内参照以检测DNA 的质量，以避免假阴性情况的出现。【结论】所建立的三重 PCR 检测方法实现了在一次 PCR 反应中快速、准确地同步检测香蕉枯萎病菌 1 号和 4 号生理小种，对检测香蕉苗 是否感染枯萎病及蕉园土壤是否受到香蕉枯萎病菌的污染具有重要意义。 关键词：香蕉枯萎病菌；１号和４号生理小种；三重PCR；快速检测与鉴定 Rapid Detection and Identification of Fusarium oxysporum f. sp. cubense Race 1 and Race 4 1 1,2 1 1 1 1 LI Min-hui , YU Xiong-tao , WANG Hong-fei , ZHOU Jia-nuan , XI Ping-gen , JIANG Zi-de 1 2 ( College of Natural Resources and Environment, South China Agricultural University, Guangzhou 510640; Guangdong Yuewei Edible Fungi Technology Co., Ltd, Guangzhou 510663) Abstract: 【Objective 】The objective of this study is to establish a method of rapid detection and identification of Fusarium oxysporum f. sp. cubense (FOC) race 1 and race 4 based on their respective specific sequence, avoid spreading and control banana Fusarium wilt