小麦抗叶锈近等基因系TcLr38的cDNA-AFLP分析.pdfVIP

中国农业科学 2010,43(2):293-303 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.02.009 小麦抗叶锈近等基因系TcLr38的cDNA-AFLP分析 1 2 1 1 1 1 1 王文霞 ，褚 栋 ，高士刚 ，闫红飞 ，缑丽倩 ，杨文香 ，刘大群 1 2 （河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心，河北保定 071001 ； 河北出入境检验检疫局，石家庄 050000 ） 摘要：【目的】分析经叶锈菌诱导小麦抗叶锈近等基因系TcLr38的基因表达情况，寻找与抗病基因表达相关 的片段。【方法】应用cDNA-AFLP技术从mRNA 表达水平研究TcLr38和感病对照Thatcher与小麦叶锈菌05-22-65 （THTS）互作时基因表达的差异。【结果】76 对引物组合检测到约 3 800 条条带，平均每一对选择性引物可以获 得 50 条条带，其中 28 对能够在小麦近等基因系 TcLr38 和感病对照 Thatcher 之间扩增出特异性条带。多态性条 带划分为 8 种类型，其中 3 种类型可能与抗病基因相关。最终得到 95 条小麦抗叶锈近等基因系 TcLr38 的特异性 表达的转录衍生片段（TDF），其中 19 条差异 TDFs 只在接种叶锈菌的 TcLr38 中出现，为上调表达，而 8 条差异 TDFs为下调表达。对可能与抗病相关的特异TDFs中的21条片段进行序列测定与分析，经BLASTx比较，17个TDFs 所推导的蛋白质序列在数据库中找到其所对应的同源序列，15个TDFs 为已知功能的基因。【结论】通过对功能已 知的基因分析，推测决定蛋白激酶C、ATP 结合蛋白、类受体激酶、信号传导组氨酸激酶（HPK）、肽酶家族M23、 Dnak抑制蛋白 DksA、甲硫氨酸tRNA合成酶、RanGTP酶激活蛋白1、烯酰辅酶A水合酶的TDFs可能与抗病或防御 过程相关。 关键词：小麦叶锈病；Lr38；cDNA-AFLP；差异表达 cDNA-AFLP Analysis of Near-isogenic Line TcLr38 Resistance to Wheat Leaf Rust 1 2 1 1 1 WANG Wen-xia , CHU Dong , GAO Shi-gang , YAN Hong-fei , GOU Li-qian , 1 1 YANG Wen-xiang , LIU Da-qun 1 ( College of Plant Protection, Agricultural University of Hebei/Biological Control Center of Plant Diseases and Plant Pests of Hebei Province, Baoding 071001, Hebei ; 2Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shijiazhuang 050000)