小麦蓝矮病植原体延伸因子(EF-Tu) tuf基因序列的同源性分析.pdfVIP

中国农业科学 2006,39(1):74-80 Scientia Agricultura Sinica 小麦蓝矮病植原体延伸因子(EF-Tu) tuf基因序列的 同源性分析 1 1 2 1 1 安凤秋 ，吴云锋 ，孙秀芹 ，顾沛雯 ，杨 英 1 （西北农林科技大学植物保护学院植物病毒研究室／陕西省农业分子生物学重点实验室，杨凌 712100 ； 2 山西运城农业职业技术学院，运城 044000 ） 摘要：【目的】利用分子生物学方法分析小麦蓝矮病植原体延伸因子 tuf 基因，从亚组水平上确定小麦蓝矮 病植原体的分类地位。【方法】电镜观察自然发病的小麦蓝矮病病叶；用引物fTufu/rTufu对小麦蓝矮病植原体延 伸因子tuf基因进行PCR扩增；核苷酸序列测定及分析。【结果】经电镜超微结构观察，在韧皮部观察到大量典型 植原体。通过PCR扩增得到约 850 bp的特异片段。感受态转化后，进行测序，结果表明小麦蓝矮病植原体tuf基 因片段长 842 bp，编码 280 个氨基酸。分析比较 15 种植原体延伸因子 tuf 基因的同源性，结果表明小麦蓝矮病 植原体与三叶草绿变（KVF）亲缘关系最近，核苷酸同源性为 99.9％，氨基酸同源性为 100％。【结论】从亚组水 平上确定了小麦蓝矮病植原体的分类地位，为研究小麦蓝矮病植原体的来源及致病分子机理提供理论依据。 关键词：小麦蓝矮病；植原体；延伸因子tuf 基因；同源性 Homologic Analysis of tuf Gene for Elongation Factor Tu of Phytoplasma from Wheat Blue Dwarf 1 1 2 1 1 AN Feng-qiu , WU Yun-feng , SUN Xiu-qin , GU Pei-wen , YANG-Ying 1 ( Plant Virology Laboratory of College of Plant Protection Northwest A F University, Shaanxi Key Laboratory for Agriculture Molecule Biotechnology, Yangling 712100 ; 2 Yuncheng Vocational and Technical College of Agriculture of Shanxi, Yuncheng 044000) Abstract: 【Objective 】The aim is to analyze the phytoplasma tuf gene of wheat blue dwarf (WBD). Then this study can differentiate and classify phytoplasma of WBD from subgroup. 【Method 】 Diseased wheat was observed under the electron microscope and primers (fTufu/rTufu) for phytoplasma tuf gene(EF-Tu) were used to amplify DNA samples extracted from infected wheats, then the amplified fragment was transfo