ω-3脂肪酸去和酶基因△17真核表达载体的构建表达与功能研究.pdfVIP

山东农业入学坝七学位论义 中文摘要 多刁i饱和脂肪酸(polyunsaturatefatty 多不饱和脂肪酸((o．3 acids，(o．3 polyunsaturatedfatty PUFAs)是具有广泛生物学功能的多 不饱和脂肪酸，在预防和治疗心脑血管等多种疾病方面有着重要作用。to．6多不饱和脂 acids，∞一6 肪酸(t．O．6 fatty PUFAs)和to．3多不饱和脂肪酸二者含量的平 polyunsaturated 衡对于机体的稳定和『F常发育非常重要。人体自身缺少合成∞．3脂肪酸相应的酶类前体 PUFAs转化为u．3 物，并且不能将∽．6 PUFAs，目前，哺乳动物只能通过长期摄取富含 ∽．3PUFAs的食物来提高体内u．3PUFAs的含量，并且来源相当有限。 本试验将马铃薯晚疫病菌(Phytophthorainfestans)的多不饱和脂肪酸去饱和酶基因 根据哺乳动物的密码子偏好性和基因表达特征对其编码区(CDS，codingsequence)优化 改造，从而获得基因片段，该基因编码区全长1086bp，编码362个氨基酸，对这两种基 因进行同源性比较，分析其核苷酸序列的同源性为85．18％，编码的氨基酸序列没有发 生改变。△17基因可以特异性的催化花生四烯酸(Arachidonic 化为二十碳五烯酸(eicosapentenoic I和EcoR 17通过脂质体介导的方法转染中国仓鼠卵巢 plRES2．AcGFPl和plRES2．AcGFPl．A ．(CHO)细胞系并对其进行G418抗性筛选，获得了稳定表达的转基因细胞系。 完全能够在CHO细胞中高效的异源表达并发挥其(o．3脂肪酸去饱和酶的作用。ARA作 (Phytophthora 挥作用。本研冗为进一步构建富含u．3多不饱和脂肪酸的转基因动物模型以及研究该基 因的功能提供了重要的理论基础。 关键词：多不饱和脂肪酸去饱和酶：载体构建：CHO细胞：真核表达：功能研究 u．3脂肪眩去饱和酶牲川△i7真核表达载体的构建表达’j功能叫究 ————————————————————————————————————————————————————————————————————————————一一‘ Abstract forhuman nutrient oa-3 essential body．The fattyacids(PUFAs)are Polyunsaturated broad exert functions，and acids((o一3PUFAs)havebiological many fatty polyunsaturated andotherdiseases．Thebalance and actionsoncardiovasculardiseases preventivetherapeutic acidsis betweent．O