土传植物病害拮细菌根围生态学研究.pdf

摘 要 从浙江大学华家池蔬菜所羊l|杭州市蔬菜所的老熟菜地土壤中分离到大量二}： oxysporumLsp． 能促进黄瓜种子的萌发；6要菌株都能促进黄瓜苗的生长、增加苗干物质重量。 在接种引起黄瓜苗期猝倒病(eythium oxysporum spp．)和中期枯萎病(Fusarium f．sp．cucumerinum)的篙栽测定中．发现它们能明显提高防病效果。 根掘格兰氏染色反应、生理，卜化测定和16SrDNA序列同源性比对，鉴定了 生防效果相对稳定的4个菌株，分别为ZJl4(Bacillus subtilis)，ZJ45(Pseudomonas 相对于革兰氏阴性细菌定臻研究的蓬勃发展，革兰氏阳性细菌缺乏稳定、高 s“6ff协)由于其具有较强的抗逆性， 效的标记系统。而枯草芽孢杆菌(Bacillus 在生物防治研究中越来越受到重视。为了进一步研究生防枯草芽孢杆菌在植物根 际的定殖情况，对其进行标记是有必要的。因此，根据绿色荧光蛋白基因和枯草 pRP22一GFP。经原生质体转化法转化B．subtilis 均得到有良好发光表型的转化子。并且，室内平板显示，工程菌株抑菌效果与原 始菌株无明显差异，并且在紫外玎F易于区别。 关键酬：生物防治：细菌裕定：帖搴芽孢杆菌：绿色荧光蛋白 V 致谢 本研究是在导师张炳欣教授的悉心指导和严格要求’F完成的。三 严谨的治学作风将使我受益终乍。谨此向导师表示由衷的感谓}并致以 诚挚的敬意。 衷心感谢浙江大学生物技术研究所给予我帮助的所有老师和同 学。感谢本实验室各位同学在研究过程中给予的大力支持和帮助。衷 心感谢江苏省农业科学院陈志谊老师和姚震声同学给我们提供的宝 贵的部分实验材料。 特别感谢我的家人多年来支持我、鼓励我，在生活上给了我无微 不至的关怀，使我毫无后顾之忧，一心完成我的学业。 张震 2004年5月于华家池 第一部分文献综述 第一章植物病害生物防治的研究概况 植物土传病害是一类重要的植物病害，通常侵染根部，引起植物根部乃至全 株性的病害。这类病害的病原物可寄生于多种寄主植物及其残体上，或处于休眠 状态，或寄生在间接寄主体内以备有利时机侵染寄主植物；然后病原菌通过风、 雨和灌溉等途径迅速传播。长期以来，植物保护的重点一直放在地上部分的治理， 土传病害由于病原茵所处环境的特殊性，没有受到应有的重视。因而，日益成为 农业损失的一个重要原因。 土传的植物病害的病原菌可以是真菌、细菌、线虫和病毒等，代表性的种属 solani 如Fusarium f．sp．phaseoli、Fusarium oxysporum solani、Sclerotium spp．、Rhizoctonia scleroHorum、Phytothora dahliae、Verticillium albo-atrum等。它们往往侵染植物根部，引起作物生长期的 根部以至全株性病害：或是在土壤中越冬越夏为下一生长季的侵染源，完成瘸原 菌的病害循环。土传病害的发生和流行，年度间波动不大，且易受土壤环境和栽 培措旅的影响。同时这类病害往往也属于种传病害，病原菌可能依附在种子表面， 随着播种进入土壤，进一步萌发而侵染作物。 归结起来，植物土传病害病害的发生有其必备的条件：(1)感病植物(寄主 或感瘸体)；(2)根的表面有足够的病原菌繁殖体或接种体密度；(3)病原繁殖