卵泡抑素影响牛胎早期发育的研究.pdfVIP

摘要 摘要 目前虽然牛的胚胎体外操作技术已经比较完善，但是囊胚率等胚胎发育指标仍然不能和 体内相比，发育率低下仍然是限制胚胎工程技术的一个主要瓶颈。所以本研究试图通过添加 卵泡抑素来提高囊胚率。 本研究采用了胚胎体外操作方法，显微注射方法，分子生物学方法，荧光免疫学方法等 技术手段，惊喜的发现发生早期卵裂牛胚胎如果在IVCI和IVC2阶段都添加卵泡抑素可以在 受精后第7天显著提高囊胚率和扩张囊胚率，最高的囊胚率可稳定达到65％。并且得到以下 结论。 1)在IVCl阶段添加不同浓度卵泡抑素对牛胚胎早期发育有不同影响，但是即使沉默了 也不会影响早期卵裂率，这提示我们可能在早期的胚胎发育的最初阶段，尤其是发生早期卵 裂的阶段，多p泡抑素并不是必须的，但是如果外源性的加入适量的卵泡抑素可以在正常的基 础上提高早期卵裂率。 和扩张囊胚率。在IVCI阶段添加卵泡抑素，要比在IVC2阶段添加卵泡抑素，获得显著提高 的囊胚率，添加卵泡抑素虽然影响囊胚率，这主要是通过提高滋养层细胞的数量来实现的， 但是不影响内细胞团细胞数量。 3)发生早期卵裂牛胚胎添加卵泡抑素可以在受精后第7天显著提高囊胚率。发生早期卵 裂牛胚胎，不添加或者IVCI阶段单独添加10ng／mL的卵泡抑素，也可以达到50％囊胚率， 显著高于批次对照组。发生中期卵裂牛胚胎如果在培养时不添加卵泡抑素，都显著低于在培 养时添加卵泡抑素的囊胚率，并且与批次对照组无显著差异。当加入10ng／mL浓度以上的头 蛋白时，随着浓度提高，早期卵裂率，囊胚率和扩张囊胚率显著下降。并且内细胞团细胞数 目显著减少。 关键词牛；胚胎；卵泡抑素；头蛋白；CDX2 ABSTRACT Effectthe ofBovine Follistain Embryo Development Abstract in thatisstill than Itis smooththatbovine vitro，however poorer very embryotechnology very a bottlenecklimit low rateisstill invivoblasto．The embryoengineering development major the triestoaddfoUistatinincrease rate． technology．Sostudy blastoeysts methodof This usedinvitro operation method，the study embryonicmethod，microinjection molecular method etc．The of technologydiscoverysurprise， biology,fluorescenceimmunological andIVC2