抑制素被动免疫羊生殖激素及卵泡颗粒细胞凋亡的影响.pdfVIP

摘 要 制备高效抑制素抗体对羊进行被动免疫具有经济、安全、效果好等优点。然而， 如何以少量的抗原制备高效抗体成为进一步深入研究被动免疫的作用机制，并将该技 术加以推广应用的难题。本研究采用母鸡作生物反应器，以人工合成的抑制素a亚基 抗原肽作为免疫原，制备抑制素卵黄抗体，以研究抑制素被动免疫对山羊生殖激素及 卵泡颗粒细胞凋亡的影响。 limpet 使用重氮苯法将血蓝蛋白(kcyhole 21天进行加强免疫，共加免5次，每次免疫注射2ml。初免时使用弗氏完全佐剂，免 组只注射佐剂与生理盐水的乳化物，免疫程序与试验组相同。每次免疫后10天收集 酶结合率9％)卵黄液，并合并。收集的卵黄液，纯化后冻干保存。用ELISA法分 抗体效价。结果表明：提纯冻干品在--20℃保存一个月，抗体效价不受影响(P0．05)。 经阻断抑制法检验，制备的elgY特异性强，与卵泡刺激素(FS两无交叉反应。 本试验检测了elgY的生物活性，将30只45日龄，体重为100—1159，未成熟的 FSH或800ul阴性卵黄液，连续注射3天，第5天取出子宫， 800ul提纯elgY、10IU 剥离附着脂肪组织后称重，测定该抗体的生物效应。结果表明：lOOul抗体处理组与 FSH处理组对 重效应不依赖抗体剂量，为后续的抑制素被动免疫剂量效应，即筛选最佳免疫抗体剂 量的研究提供了重要的参考。 为了研究抑制素被动免疫对山羊生殖激素的影响，将12只黄体中期健康雌波尔山 羊分为两组，每组6只，并对山羊肌注前列腺素F．(2Q)(ProstaglandinF．(2a)，PGF2a) 结果表明：注射抗抑制素卵黄抗体后，母羊外周血液FSH水平迅速上升，注射后12h 达到高峰，直至96h保持显著高于对照组的水平，之后逐渐下降，在注射后120h降至 对照组水平：免疫后母羊血液LH水平一直处于平缓状态，低于对照组；免疫12h后母 羊外周血液E2开始升高，48h达到高峰后开始下降，直至tJl20h仍高于对照组：免疫后 12h一96h母羊外周血液P高于对照组。 本文首次研究了抗抑制素抗体对山羊卵泡颗粒细胞凋亡的影响，将卵泡颗粒细胞 FSH组一样能够显著抑制卵泡颗粒细胞凋亡(PO．01)。 得大量高效价、高特异性的抗抑制素elgY。用纯化的抗抑制素elgY免疫山羊后，山羊 血液中FSH、E2和P水平提高；血液中LH的水平降低。在体外原代培养条件下，抗 抑制素eIgY可延缓卵泡颗粒细胞凋亡的速度。研究结果丰富了抑制素被动免疫领域的 研究资料，也为进一步研究抑制素被动免疫对山羊生殖生理的影响机制奠定了基础。 关键词：抑制素；被动免疫；山羊：生殖内分泌；细胞凋亡 Inhibinonhormone EffectsofPassiveImmunization against Cellin ofewesand ofFollicularGranulosa profile Apoptosis Vitro Chert and and Shouyun(Animalgeneticsbreedingreproduction) Directed byProf．zengXianyin Abstract inhibinof were The of immunization ewes ad