茄褐纹病菌生物特性、致病性及寄主抗性机制的研究.pdfVIP

摘要 本文对茄褐纹病菌的生物学特性、形态、致病力、胞外酶以及同工酶谱进行了研 究析，生物学特性方面主要涉及培养基的选择、碳氮源、温度、PH值、光照等内容， 寄主抗病性涉及不同品种的抗性鉴定及酶活变化进行了测定、不同抗性品种的同工酶 分析等，所得结果如_F．： 1 生物学特性测定 从合肥、和县采集的标本上分离出两种类型的分生孢予a型及B型。寄主的不同 部位病斑上的孢子类型有很大差异，果实上。型、B型分生孢子都存在，多数为G 型孢子；茎杆上采集的孢子都是p型；叶片上产主的均为a型分生孢子。 对于培养基的选择，不同菌株有差异，合肥的菌株HA、I{B在茄汁及PSA培养基 上生长较好，和县的菌株HY在PSA及玉米培养基上生长较好。燕麦培养基是最适宜 褐纹病菌产孢的培养基，其次为PSA，而能够使褐纹病菌产孢的培养基有PSA、燕麦、 玉米、胡萝h培养基，产孢期在10天以上。燕麦培养基适台作为保存褐纹病菌菌种 的培养基使用，PSA培养基适合一般培养使用。 在6种碳源中，蔗糖的利用最好，其次为麦芽糖、葡萄糖，最差为乳糖。对于6 种氮源的利用，3个供试菌株在含硝酸钠、硝酸钾的培养基中生长最好，最差为硫酸 铵，其他3种氮源无明显差异。 pH值为7为最适合褐纹病菌生长，在pH值达到3时，3个菌株几乎停止生长， cm。 而在pH值为11时，3个菌株的菌落直径仍分别为1．1、1．9、1．4 35 oc～ oc年n 在温度影响实验中，当温度为lo oc时，褐纹病菌基本停止生长，25 30℃之间较适合褐纹病菌生长，28℃为最适温度。 不同光照处理下，自然光最适宜褐纹病菌的生长，其次为连续光照，连续黑暗条 件下，菌株生长最差。 2茄褐纹病菌分泌的胞外酶研究 3个供试菌株分泌的多酚氧化酶的活性表现相似，不随培养时间的变化而变化。 而在漆酶的变化趋势上，3个供试菌株的表现不同，HA在第7天出现一个峰值；HB 在第7天出现一个较小的峰值后，在第13天又出现一个较大的峰值；Hy则是从第4 天起一直呈现缓慢上升的趋势。漆酶活性的差异能反映出菌株问的生理生化差异。 3褐纹病菌同工酶电泳分析 对HA、HB、HY三个褐纹病菌株进行了酯酶、过氧化物酶、多酚氧化酶的聚丙烯 酰胺凝胶电泳的比较研究，发现三菌株在酯酶酶带数量上的差别较大，HA、HB、}fY 分别有3条、2条、4条酶带：在多酚氧化酶酶带的数量上，HA、HB、}{Y分别为2条、 l条、2条；在过氧化物酶酶带数量上，三菌株都只有1+条酶带。相比之。F，酯酶较 适合用来区分褐纹病菌株间的差异。 4茄子品种抗性鉴定 根据病斑扩展速度、病斑大小及潜育期的不同，】3个茄子品种可划分为感病、 中度感病、抗病3种类型，其中感病品种有3个品种，中感品种有5个，抗病品种有 4个。 5不同抗性品种茄子的酶活测定 距接种点不同距离寄主酶活测定了3种酶，多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、 苯丙氨酸解氨酶(PAL)。在PPO酶活测定时，抗病品种表现出缓慢上升的趋势，感病 品种表现为缓慢下降，而且因侵染的菌株不同表现出差异；在POD的测定中，抗性品 种的酶活变化不明显，而感病品种则在剧烈下降后有所回升，而且在距离接种点最近 的点上，感病品种的酶活表现高于抗病品种，3个菌株的侵染引起的酶活表现较为～ 致；在PAL的测定中，发现抗病品种与感病品种各舟的酶活变化无规律可循． 在不同接种天数的寄主酶活测定了两种酶活，多酚氧化酶与过氧化物酶。在POD 的测定中，抗病品种有一个峰值，这个峰值的大小以及出现时间因侵染菌株的不同而 不同，抗病品种的酶活整体上呈上升趋势；中度感病品种出现两个峰值；感病品种的 峰值为一个；未接菌的cK中，抗病品种的酶活变化较大，感病品种的酶活变化不大。 在PPO的测定中，抗病品种的酶活从第l天到第13天为缓慢下降，无剧烈波动：中 等感病品种的有一个峰值出现，之后迅速下降；感病品种在从第一天起就迅速下降， 之后有小幅度的回升，3个菌株的侵染表现～致。 6寄主同工酶酶谱分析 对6个不同抗性的茄子品种做了