蒜氨酸的提取及化方法研究.pdfVIP

江苏大学硕士学住论文 摘要 蒜氨酸是大蒜中重要的生理活性物质，其化学名为S一烯丙基一L一半胱氨酸 亚砜。现代研究已经证明蒜氨酸具有降血脂、抗血小板聚集、抗肿瘤、降血糖 等功能。本文以新鲜大蒜为原料，通过预处理、离子交换、硅胶层析、冷冻干 燥等步骤研究了蒜氨酸的提取纯化方法。 建立了三种检测方法，其中毛细管电泳法作为主要的分析手段应用于蒜氨酸的 检测尚属首次。通过优化试验，选定毛细管电泳的分析条件为：未涂层石英毛 试验了高温和微波两种灭酶方法，结果表明，采用微波处理法(900W， 2min／2009)的效果优于高温蒸煮法，前者比后者蒜氨酸保留率高出28％。分别 采用普通溶剂提取法和超声辅助提取法对蒜氨酸进行提取，通过比较得出，超 声提取法无论从提取时间和提取率上都明显优于普通提取法。对比了低温有机 溶剂沉淀法、三氯乙酸沉淀法、醋酸铅一硫酸钾沉淀法、Sevage法、超滤法、 ZTC沉淀法等脱蛋白方法。经过比较可以看出，超滤法和ZTC沉淀法效果较好， 蛋白脱除率分别为77．4％和85．3％，而且适于批量处理。 采用等电点沉淀法，估测出蒜氨酸的PI为5．5。通过静态吸附试验，选定 732阳离子交换树脂为离子交换剂。确定了最佳离子交换条件：起始缓冲液： DH3．5，浓度20mmol／L的柠檬酸．柠檬酸三钠缓冲溶液：洗脱液：pH9，0，浓度 mL／min；洗脱速 0．1mol／L的磷酸氢二钠．磷酸二氢钠缓冲溶液；上样速度：O．5 度lmL／min；检测波长：220rim。利用硅胶柱层析法对样品进一步纯化，得出 了较优的层析条件：流动相为正丁醇．冰乙酸．水(4：l：5)；干法上样；上样 量为拌样硅胶一分离硅胶(1：10)；流速O．5mL／min。 采用冷冻干燥法制备了蒜氨酸成品，纯度达到84．7％，总体收率为O．91％o· 确立了合适的冻丁参数：预冻一80℃，12h；主干燥压力0．05mbar(一48℃)， 安全压力0．09mbar(--43℃)，主干燥时间8h。 关键词：蒜氨酸；灭酶：脱蛋白：离子交换；硅胶层析；冷冻干燥 蒜氯酸翦提取与匏诧方法研究 Abstract Alllinisamateri鞋with inthe the importantbiological activity garlic,and chemicalnameis sulfoxide．Latestresearchhave thatalliin S-allyl，L．cysteine proved canlowerlevelin the from the decrease lipid blood,restraiaplateletaggregating，and blood alSOcaⅡlowerblend andhaveexcellent addifion,alliin sugar,in pressure anticancerfimction．1_1Iisstudiedtheextractionand ofa／liinfrom paper pm-itication fresh withthe and garlic stepofpre—disposal,ionexchange，silicagel