壬基酚在罗氏沼体内代谢及其对性腺发育相关基因表达的影响.pdfVIP

壬基酚在罗氏沼虾体内的代谢及对性腺发育相关基 因表达的影响 摘 要 壬基酚（Nonylphenol ，NP ）作为一种非离子表面活性剂，给人们带来便利 的同时，也带来了许多负面生态效应，如雌激素效应等。本文以罗氏沼虾 (Macrobrachium rosenbergii)为研究对象，采用药浴方式，研究了NP 在组织中的 药代动力学特征，NP 对各组织结构变化的影响，以及NP 对性腺发育相关基因 表达量的影响。主要结果如下： 1、NP 在罗氏沼虾组织内的代谢动力学 将罗氏沼虾雌虾浸浴在 1 mg/L 的NP 水体中3 天，在转入清水后0、0.5、1、 3、6、12、24 、48 、96、192 h 取样，然后采用液相-质谱联用法检测各组织中的 NP 含量，并用WinnolinV6.0 软件非房室模型统计矩方法计算药代动力学参数。 结果表明其药时曲线出现双峰现象。肝脏、卵巢、眼柄、肌肉组织中的NP 达峰 时间（Tmax ）分别为3 h、3 h、3 h 和1 h；达峰浓度（Cmax ）分别为13447.95 µg/kg、 4263.66 µg/kg 、2860.42 µg/kg 、1299.06 µg/kg，表明NP 在罗氏沼虾体内吸收迅 速、分布较快；AUC 分别为 512975、240594 、44878 和 11700 (µg/L•h) ，表明 NP 在肝胰腺中吸收量最大，卵巢次之，在眼柄和肌肉中较少；药物分子平均滞 留时间（MRT ）分别为40.65 h 、54.82 h、61.53 h 和32.97 h，可以看出NP 在眼 柄和卵巢中平均驻留时间较长，在肝胰腺和肌肉中较最短；半衰期（t1/2 ）分别 为28.5 h 、33.2 h、85.0 h 和38.6 h，表明NP 在肝胰腺和卵巢中的代谢速率最快， 在肌肉中代谢速率较慢，在眼柄中代谢速率最慢。 2、NP 对罗氏沼虾精巢、卵巢、肝胰腺组织学变化的影响 将罗氏沼虾暴露于不同NP 浓度（1、10、100 μg/L）水体中20 d ，用石蜡组 织切片方法研究NP 对试验虾精巢、卵巢、肝胰腺的组织学变化的影响。结果表 明：低浓度组（1 μg/L）中罗氏沼虾的这三个组织均与对照组无明显差异；在中 （10 μg/L）、高浓度（100 μg/L）组中，精巢和肝胰腺表现出受损伤程度随暴露 浓度的升高和暴露时间的延长而逐渐加剧的趋势；NP 对卵巢的影响主要体现在 发育程度上，结果表明，随暴露浓度的升高和暴露时间的延长，卵巢发育程度加 快，性腺发育周期缩短。 3、NP 对罗氏沼虾性腺发育相关基因（Mar-SGP-B 、VTG、VgR）表达量的影响 将罗氏沼虾暴露于不同NP 浓度（1、10、100 μg/L）水体中20 d ，用SYBR I Green 荧光定量PCR 法检测NP 对罗氏沼虾性腺发育相关基因（Mar-SGP-B 、VTG、 VgR）表达量的影响。结果表明，低浓度组（1 μg/L）对Mar-SGP-B 、VTG、VgR 基因表达无显著影响。中浓度组（10 μg/L）和高浓度组（100 μg/L）NP 对 Mar-SGP-B 有抑制效应，对 VTG、VgR 基因具有诱导效应。总体来看，高浓度 组比中浓度组的抑制或诱导效应效应更显著，而且效应出现的时间更早，且在雌、 雄虾中表现出抑制或诱导程度不一致。在一定范围内，NP 对Mar-SGP-B 基因的 抑制效应及对 VTG、VgR 基因的诱导效应呈现一定的剂量-时间效应。 关键词：壬基酚，罗氏沼虾，药物代谢，性腺发育 II The metabolism of nonylphenol in Macrobrachium rosenbergii and effects of nonylphenol on gonaddevelopment related genes of Macrobrachium rosenbergii Abstra