大腹园蛛组织蛋酶b相关cdna avg1克隆及表达研究.pdfVIP

中文摘要 半胱氨酸内切蛋白水解酶，具有，、谱的蛋白酶活性，参与机体多种肿瘤细胞浸润 转移等多种生理牙H病理过程，因此越来越受到人们的』“泛关注。 EcoR l，ⅣcoI酶l；『_J处理，回收纯化后，连接构建两个重组载体，转化兜隆宿主凶 E．coliDH5a中，经酶切及PCR鉴定为刚性克隆后进…步测序签定，结果碱鉴、 得的重组质粒Avg·28a、Avg一20b可以用于卜．步表达。 BL21 (DE3)中，鉴定为阳性克隆后，f¨=JtIPTG37 39．6％，f1．裘 f35459．13Da),t、日当，经薄层扫描表达外源蛋白量．-全菌体蛋白总量nq 达形式卜要为包涌体，将表达的包涵体蛋白进行变一陀、复性处理厉测定蛋白酶活 榆测到了Avg l-I酶活性，显卅÷了11日履的酶活性。 制备包涵体蛋白，电洗脱纯化后，常规办法免疫古成獭兔，结束后预动脉采 珈，经ELISA检测，呈明显的阳性反鹰。Western 白刍‘i合带，Avg原核表达