一些重要斑痣盘的分类、培养及rapd分析.pdf

摘要 本论文从形态解剖、个体发育、生态、地理分布等特征对斑痣盘菌科中7个属的 重要成员～些种进行较系统的分类研究，同时对齿裂菌属、皮下盘菌属以及斑痣盘菌 属的重要种进行种内和近似种问的RAPD分析。 对采自皖南山区、合肥地区和保存于安徽农业大学森保教研室(AAUFP)共200余 花散斑壳(三，osmanthi)。对其编制了二叉式分种检索表，对各种均提供了形态解剖 学特征的描述与图解以及寄主、生境和世界分布的记录，并加以讨论。 利用组织分离法对采自安徽黄山风景区及合肥地区的部分活斑痣盘菌材料在 种，其中包括皮下盘菌属的2个未知种。不同属的各菌培养性状存在显著不同，同属 的不同种也有较大差别，甚至同种的不同分离株在生长速度、菌落颜色、大小以及成 熟期等方面均有差异。培养期间各菌株定期进行观察描述，少数产生分生孢子器及线 (环)纹，但均不产生子囊果。 不同分离株以及2个斑痣盘菌属(Rhytisma)不同种分离株以及近似种坏纹符氏盘菌 和近似种间的RAPD分析。RAPD技术具有引物没有严格的种属界限、多态性强及检 测灵敏等特点，但RAPD技术的稳定性和重复性差，因此，有必要寻找一个适合本 试验的RAPD反应体系，提高其稳定性和可重复性。本论文分别测试了模板DNA浓 DNA聚合酶浓度以及退火温度和时间、 度、dNTPs浓度、Mg”浓度、引物浓度、Taq buffer、 延伸时间、循环次数等对RAPD反应结果的影响。结果表明：10×PCR DNA模板和1U 7的酶为最佳反应浓度；95℃预变性5 伸2min20sec、72℃延伸10min、扩增50个循环为最佳反应程序。 从100个随机引物中筛选出】5个引物对l 离株进行RAPD分析，共扩增出136个位点，多态性位点数为134个，占98．5％。其 中随机引物$96扩增出的条带数最多为1 3个，扩增出的条带数最少的是引物S11和 进行种内或近似种间遗传差异分析。根据UPGMA方法构建聚类树状图，在遗传距离 4类，该结果与表型性状 为4．68处15个皮下盘菌属不同分离株被聚成A、B、c、D 分类和培养性状研究结果基本吻合。 片段进行种内或近似种间的遗传差异分析。根据UPGMA方法构建聚类树状图，在遗 传距离为5,3处10个齿裂菌属不同分离株被聚成I、II、III3类，其中类群III包括2 也进行了RAPD分析，其中Rhyt捃ma 高达91．9％，加之这两个种在形态解音4学和培养性状方面也非常相似，因此可以初步 为Rhytisma的异名。 关键词：斑痣盘菌科，分类学，培养性状，随机扩增多态性DNA分析 Abstract seven were Some membersof inRhytismataceaesystematically important genera studiedfrom and morphology,developmentalbiology,ecology andsimilar RAPD of was to analysisimportantspeciesapplied intraspecific interspecific and Rhytisma． Hypoderma，Coccomyces fromthemountainofsouth an