microrn在肾透明细胞癌中的表达及rnai载体pdsred2-silenceru6构建.pdf

缩写词表 缩写词 英文 中 文 miRNAmicroRNA 小RNA CCRCCClearcellrenalcellcarcinoma 肾透明细胞癌 Microarray 基因芯片 CellSorter FACS FluorescenceActivated 流式细胞仪 PCR Real—time 荧光定量PCR PBS bufferedsaline 磷酸缓冲液 phosphate RN简 RNAinterference RNA干扰 shRNA Short RNA 小发卡RNA hairpin 第1章microRNA在肾透明细胞癌中的表达 i 第1章mcroRNA在肾透明细胞癌中的表达 摘要 肾癌是泌尿系常见的恶性肿瘤，发病率仅次于前列腺癌和膀胱癌居第三位， cellrenalcell 占全身恶性肿瘤的2．3％，死亡率超过40％。肾透明细胞癌(clear carcinoma，CCRCC)是肾恶性肿瘤中最常见的类型，约占75％，发病机理尚不十 分清楚，血管形成丰富为其特点，浸润和转移是其主要播散途径，大约40％的患 者术后复发转移。转移性肾癌和手术后复发的肾癌，预后较差。肾癌的死亡原因 主要是由于肿瘤的侵袭和转移。因此有必要对肾癌的发病机理进行深入的研究， 为肾癌临床诊断和治疗提供依据。 白质的RNA，成熟的miRNA通过特异的识别其相应的靶基因，降解或抑制靶基 因的mRNA的表达，调控细胞分化，增殖和调亡等。目前，越来越多的研究证 实miRNA在肿瘤的发生和发展中起着重要作用，而且miRNA表达情况可以预 测肿瘤的恶性程度和肿瘤病人的预后。 为研究miRNA的在肾透明细胞癌中表达情况及其作用，我们应用miRNA miRBasel0．11，检测。肾透明细胞癌中miRNA表达情况，筛选出在肿瘤组织中有 PCR方法并结合临床资料进行进 明显表达改变的miRNA分子，运用Real．time 一步研究。miRNA基因芯片分析结果表明：在筛选条件Fold change1．5，ANOVA P 分子存在差异表达。38例样本聚类分析明显分成不同组别。与正常组织相比， hsa．miR．141，一200c在肿瘤组织中低表达：T1期肿瘤组织与远处转移肿瘤组织 相比，hsa．miR．10b*在T1期肿瘤组织中高表达，在远处转移肿瘤组织中低表达。 Real．time 在8例T3a期肿瘤组织中，4例呈高表达，与T1期肿瘤组织表达趋势一致，4 例呈低表达，与远处转移肿瘤组织表达趋势一致。临床随访资料分析发现，4例 瘤远处转移；而4例hsa．miR．10b*J]中瘤组织高表达病人中，2例治疗后已发生肿 瘤远处转移，另外2例尚在肾切除术后1年内，仍未发现肿瘤转移，有待进一步 临床观察随访。 由此我们得出结论：1．正常肾组织与肾透明细胞癌组织间，miRNA存在差 ．200c可作为区分肿瘤与正常组织的潜在指标。4．hsa．miRlob木可作为区分T1期