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中山大学硕士论文 GABABRI和mGluRI在外伤性癫痫患者病灶中的表达 病灶中的表达 专 业：法医学 硕士研究生：黄永华 导 师：竞花兰教授 中文摘要 1．研究目的 癫痫(epilepsy)是一组由大脑神经元异常放电所引起的短暂中枢神经系 统功能失常为特征的慢性脑部疾病，具有突然发生、反复发作的特点。这些异常 放电的神经元群被称为癫痫灶。外伤性癫痫(Post-traumatic epilepsy，PTE) 是一种以反复痫样发作为特征的疾病，是脑外伤后常见的继发性疾病，系因各种 暴力作用于颅脑，致脑实质发生继发性损伤，产生癫痫病灶，引起癫痫发作。 癫痫的病因异常复杂，发病机制至今尚未完全阐明。但在神经递质方面的 nervous 研究较多，普遍认为癫痫发作与中枢神经系统(centralsystem，CNS) 内兴奋性氨基酸与抑制性氨基酸神经递质的平衡失调密切相关15J，这些递质的失 衡使神经元异常放电，神经元放电频率过高并无限制地向周围神经元扩散，导致 acid，GABA)为代表的 癫痫发作。中枢神经系统内以Y一氨基丁酸(Y．aminobutyfic acid，Glu)为代表的兴奋性神经递质增 抑制性神经递质减少与以谷氨酸(glutamie 多是癫痫发生的主要机制之一，并且已得到证实。神经递质要发挥效应要通过相 应的受体来介导，因而目前国内外的研究主要集中在其相应受体的改变。国内外 已有GABAB受体和mGluRl在非外伤性癫痫动物模型或患者中的表达变化研究，并 已证实它们在非外伤性癫痫发生发展中的作用；但尚未见至IJGABAB受体和mGluRl 在人脑外伤性癫痫发病机制中所起作用的研究，它们在外伤性癫痫患者中是否也 存在表达变化，以及表达的程度如何，是本实验研究的内容与目的。 中山大学硕士论文 GABABRI和mGluRl在外伤性癫痫患者病灶中的表达 本研究以外伤性癫痫、非外伤性癫痫病人癫痫灶手术切除标本及非癫痫组 脑组织为研究对象，首先用光镜(HE染色)观察三组标本在形态学上的差别，接 述实验设计试图阐明mGluRl、GABABRl在外伤性癫痫发病机制中的作用，探索 mGluRl和GABABlR在外伤性癫痫中可能的临床和法医学应用价值。 2．研究方法 本实验共分为三组：外伤性癫痫组(脑外伤后继发癫痫患者)15例、非外 伤性癫痫组(原发性性癫痫患者)15例、非癫痫对照组(交通事故死亡者)15 例。 2．1对所收集的皮质样本均进行HE染色，镜下观察各组标本形态学改变； RlmRNA 2．2运用RT-PCR技术从分子水平比较各实验组mGluRl和GABAB 表达水平； 2．3用免疫组织化学染色技术和荧光免疫组化染色技术从蛋白水平定性观 察各实验组mGluRl和GABABRI对应的蛋白表达水平； 2．4运用wesmmblot技术量化mGluRl和GABAB R1对应的蛋白在各实验组 中的表达量，比较二者在外伤性癫痫组、非外伤性癫痫组和对照组中表达量的 变化及差异。 3．研究结果 3．1脏染色观察 外伤性癫痫组和非外伤性癫痫组均存在神经元数目减少，核固缩深染，突 触弯曲甚至呈螺旋状，胞体缩小变形，细胞内尼氏小体消失，胞浆变性、肿胀 甚至呈空泡状，染色呈深伊红色，胶质细胞明显增生，并可见嗜神经细胞现象 (神经元被胶质细胞围绕吞噬)及胶质细胞结节。 非癫痫组没有观察到明显的神经元数目减少及胶质细胞增生等现象，但可 以观察到部分神经组织水肿。