cyclinblt;,1gt;、p34lt;#39;cdc2gt;在非小细胞肺癌中的表达及意义.pdf

中 文 摘 要 前 言 了在世界范围，月中瘤问题以其高发生率和高死亡率成为广大医 学界关注的热点。随着生存环境的污染和吸烟人数的增多，肺癌 逐渐成为最常见的恶性肿瘤。因此，对肺癌癌变机理的研究及其 实际意义成为当代医学的一个重要课题。 对细胞周期调控机理的研究是癌变机理的重要内容之一。细 胞周期复杂的顺序过程是在细胞周期检验点Checkpoint的监控下 细胞周期调控因子及其相互作用完成的。细胞周期调控因子包括 细胞周期蛋白(CYCLIN)，周期蛋白依赖性激酶CDK(Cyclin一de- pendentKinase)及周期蛋白依赖性激酶抑制剂CKIs(Cyclin一de- pendentKinaseinhibitor)。细胞周期调控是各种细胞周期调控因 子在细胞周期检验点Checkpoint的监控下忠实而顺序地启动和完 成细胞周期事件。随着对细胞周期及其调控的深人认识，学者们 提出了“癌症可能是一类细胞周期异常性疾病”的观点。绝大多 数肿瘤细胞都存在若干细胞周期调控机制的改变，细胞周期调控 机制的异常可导致细胞的持续性增殖，是肿瘤发生的生物学基 础。 近年来，对CyclinD一CD凡复合物及CyclinE一CDK复合物 在乳腺癌、胃癌、前列腺癌及卵巢癌等肿瘤中的异常表达均有大量 的研究。但关于细胞周期调控因子与肺癌的相关研究则刚刚起 步，而且研究结果差异较大。尤其是关于非小细胞肺癌细胞周期 中q/M期调控因子CyclinB:和P34`2的表达状况及其与非小细 胞肺癌的生物学特征和临床病理特征关系方面尚无文献报道林 文将研究在非小细胞肺癌组织中CyclinB，和P34‘的表达，探讨 CyclinB，和P34`da的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系。 ·1 · 材料和方法 l\1.组织标本:肺癌组织标本为1999一2000年辽宁省肿瘤医院 胸外科手术切除标本。随机收集非小细胞肺癌(含癌旁增生组织 和正常肺组织)的标本100例。患者平均年龄为55.61岁(37一76 岁)，其中60岁的有63人;妻60岁的有37人。男女之比为69; 31。按WHO肿瘤分类标准:鳞癌60例;腺癌40例。根据国际抗 癌联盟(UICC)的TNM分期标准:I期16例;II期22例;IQ期60 例;W期2例。组织学分级:高分化30例;中分化42例;低分化28 例。采用免疫组化S一P法检测CyclinB:和P34`d2c的表达的状 况。结果用SPSSforwindow8.0统计学分析系统研究CyclinB:和 P34`d2c在NSCLC组织中、癌旁增生组织中和正常组织中表达的相 互关系。 2.主要试剂和来源:即用型鼠单克隆抗体P34`d`2,S一P试剂 盒、DAB试剂盒购自福州迈新公司;即用型鼠单克隆抗体Cyclin B,、抗原修复液II,胰酶消化液购自武汉博士德公司。 3.方法:CyclinB,,P34`d2,免疫组化法:石蜡切片经二甲苯脱 蜡，梯度乙醇水化。抗原修复:将切片置于lommol/1柠檬酸(钠) 缓冲液(PH二6.0)内，高压抗原修复2min;将用于检测P342的切 片用胰酶消化379010min;用于检测CyclinB:的切片滴加抗原修 复液II37T10min，其余步骤按常规免疫组化S一P法进行，DAB 显色，苏木素复染。 4.统计学分析:以确切概率法、卡方检验和相关分析进行统计 分析，0.01P--0.05为有统计学差异;;P--0.01为有显著的统计 学差异，进行双侧检验。 结 果 1.CyclinB，和P34`d2的染色定位: ·2 · CyclinB，和P34`2在非小细胞肺癌细胞中、癌旁增生的细小 支气管上皮细胞中定位于细胞质中，分别呈棕黄色和黄色染色而 细胞核无着色。 2.CyclinB:和P34`d2c表达的测定结果: CyclinB，和P342在正常组织、癌旁增生的细小支气管上皮 组织及癌组织中的表达有显著性差异(P0.01)即CyclinB，和 P34`da在非小细胞肺癌组织中有过表达现象。在癌旁增生组织中 有较正常组织中强而较癌组织中弱的表达。100例非小