bcrp，suvivin，telomerase在her2介导的乳腺癌多药耐药中的作用.pdf

腺癌多药耐药中的作用 摘要 乳腺癌是一类危害妇女健康的主要恶性肿瘤，其常规的治疗方法 主要有手术、化疗、放疗和内分泌治疗等。其中，化疗对于术前缩小 原发灶，术后预防复发和转移以及失去手术机会的晚期癌症的作用而 显示出独特的地位。但与其它许多恶性肿瘤一样，乳腺癌的多药耐受 (multidrugresistance，MDR)特性严重限制了化疗的实施。因此， 深入探讨乳腺癌MDR的机制，对于识别耐药分子标志，开展以标志物 为靶的药物筛选和基因治疗，提高化学治疗效果，具有重要的理论和 应用价值。 MDR是指肿瘤细胞对某种抗肿瘤药物产生抗性的同时，对结构和 作用机制不同的其它抗肿瘤药物也存在耐药的特性，其形成机制主要 化、抑癌基因失活，凋亡相关基因介导的凋亡通路受阻等。 人表皮生长因子受体2(humanepideral factor growth 性，在20--30％的乳腺癌中高表达，与乳腺癌的发生发展、浸润转移、 治疗效果以及转归预后等密切相关。本室前期研究表明，HER2能介 导乳腺癌细胞对部分药物的耐受，HER2高表达的乳腺癌细胞乳腺癌 活性增高，而MDRI、MRPI、TopIIa和Bcl2的表达无明显改变。为 癌多药抗性中的作用和机制，本课题结合RNAi干扰技术，主要从以 下4个方面展开研究。 1．肛R2介导的耐药和耐药逆转 和表达干扰细胞系MCF-7／HER2／Hi，RT—PCR和Westernblot检测HER2 活性的变化；同时，采用MTT法观察细胞药物敏感性的变化。结果显 ＼ 的表达水平和telomerase活性相关。 2．髓R2调节BCRP的作用机制 用pLNSX／HER2质粒与含有BCRP启动子的荧光素酶报告基因质粒 共转染MCF-7细胞，单光子检测仪测定HER2对BCRP转录活性的影响； 胞，观察该细胞BCRP表达及耐药表型。结果显示：(1)HER-2可使 BCRP报告基因中荧光素酶活性呈剂量依赖性增高(P0．05)；(2) 胞的多药耐药。 3．髓R2调节Survivin的作用机制 基因质粒共转染酪氨酸激酶抑制剂AG825处理前后的MCF-7细胞，其 结合NF—K B抑制子pBabe／Ir．Ba共转染MCF-7细胞，单光子分析仪 B特 观察干扰前后Survivin的表达及药物敏感性的变化。结果显示：(1) 酶抑制剂AG825可剂量依赖性抑制这种活化；(2)HER2可转录活化 NF-K K B启动子，而IBQ可阻断这种活化；(3)NF-KB特异性抑制 可能通过激活转录因子NF—KB而上调Survivin表达，参与乳腺癌多 药耐药的形成。 4．Telomerase介导的耐药和耐药逆转 介导了乳腺癌细胞对部分药物的耐受。 药抗性的形成有关；HER2对三者的上调作用是其介导乳腺癌多药抗 性的重要机制。本研究进一步揭示和验证了乳腺癌耐药新机制和新靶 标，对深入阐述恶性肿瘤耐药的分子机制，筛选以HER2、BCRP、 腺癌治疗方案具有重要的理论意义和应用价值。 m and in Roleof Telome均se BCRP,Survivin Activity ResistanceofBreastCancer Multidrug ABSTRACT isoneofthe common inwomen． Breastcancer most malignancies maintreatmentsforbreastcancerinclude Cur