lmp2a和blf1融合基因重组腺病毒表达载体的构建和初步应用.pdf

y i 909091 摘要 LMP2A和BzLFl融合基因重组腺病毒表达载体的构建和初步应用 中文摘要 目的 合，构建融合基因的重组腺病毒表达载体，旨在同时发挥LMP2A诱导特异性cTL和 BzLFl基因产物诱导潜伏期EBV进入裂解期复制的作用，从而协同杀伤EBv阳性肿 瘤细胞，为EBV相关肿瘤特异性治疗的I临床应用研究奠定试验基础。 方法 自EBV阳性细胞提取总RNA，经逆转录一聚合酶链反应分别获得LMP2A overlapexetension，sOE) 和BzLFl编码序列的cDNA，采用剪接式重叠延伸(spliced 技术，将两段基因通过多肽接头(Gly4ser)3DNA序列连接以获得融合基因(z2A)。 BJ5183中完成穿梭质粒与骨架质粒之间的高效同源重组，构建z2A真核表达载体 pAd—z