hmgb1对小系膜细胞细胞周期及细胞周期相关蛋白表达的影响.pdf

IIIIIII IIIII UllIIIIIIII ＼1 目 录 中文摘要………………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………………4 研究论文HMGBl对小鼠系膜细胞细胞周期及细胞周期相关蛋白表 达的影响 。 前言…………………………………………………………………………………7月【J舌…………………………………………………………………………………7 材料与方法………………………………………………………一8 结果…………………………………………………………………………………19 附图………………………………………………………………………………··20 附表…………………………………………………………………………………25 讨论…………………………………………………………………………………27 结论…………………………………………………………………………………30 1 参考文献…………………………………………………………一3 综述HMGBl的研究进展……………………………………………·33 致谢………………………………………………………………………………………··41 个人简历……………………………………_…………………………………42 中文摘要 HMGBl对小鼠系膜细胞细胞周期及细胞周期 相关蛋白表达的影响 摘 要 目的：本实验以小鼠系膜细胞MMC为研究对象，以重组HMGBl 对系膜细胞的促增殖作用以及对细胞周期调控相关因子的影响。 系统性红斑狼疮(systemiclupus 由免疫复合物沉积造成多器官损伤的自身免疫性疾病，而狼疮性肾炎 (Lupus 要原因之一。系统性红斑狼疮的发病机制仍不明朗，但通常认为，机体失 去正常免疫耐受，淋巴细胞功能异常，从而引起各种细胞因子的分泌和表 达紊乱可能是本病发生机制的核心。高迁移率族蛋白l(highmobilitygroup protein 细胞及坏死细胞主动合成和主动分泌，经与其相应受体结合，激活多种信 号转导途径，从而促进炎性因子的合成及释放，并与这些炎性因子相互作 用，引发及放大炎症效应；同时HMGBl还是一种免疫佐剂，它能够为免 疫细胞提供损伤信号，以启动免疫效应，实现对异物的清除，从而介导免 疫应答的完成。研究显示，HMGBl参与了系统性红斑狼疮，类风湿性关 节炎，干燥综合征等多种免疫性疾病的发生发展过程【l】。我们前期的实验 检测了HMGBl及其可能受体在狼疮性肾炎患者的外周血及狼疮小鼠模 型肾组织中的表达水平，结果显示：HMGBl及其可能受体在狼疮性肾炎 发病过程中呈明显的高水平表达，同时与系膜细胞增生相关，考虑 HMGBl可能通过诱导系膜细胞的异常增殖促使了增生性肾小球肾炎的 发生【2】，但其对系膜细胞可能的作用机制目前尚缺乏深入研究，因此开 展了此次试验。 方法：选取小鼠系膜细胞MMC为研究对象，随机分为正常对照组及 HMGBl刺激组，分别培养4，8和12小时，收集不同时间点细胞， 50I_tg／L 分别以流式细胞术检测小鼠系膜细胞的细胞周期分布；免疫细胞化学检测 中文摘要 Blot检测小鼠系膜细胞中 CyclinDlrnRNA表达的变化，Western CyclinDl，CDK4及p16蛋白的表达变化。 结果： ‘ 1HMGBl刺激后不同时间点小鼠系膜细胞细胞周期分布不同 例逐渐减少，而处于S期细胞所占比例增高，增殖指数