紫外分光光度计要点.pptVIP

（三）影响紫外-可见吸收光谱的因素 物质的吸收光谱与测定条件有密切的关系。测 定条件（温度、溶剂极性、pH等）不同，吸收光 谱的形状、吸收峰的位置、吸收强度等都可能发生 变化。 1.温度 在室温范围内，温度对吸收光谱的影响不 大。 2. 溶剂 注意如下几点： （1）尽量选用低极性溶剂； （2）能很好地溶解被测物，并且形成的溶 液具有良好的化学和光化学稳定性； （3）溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。 * 紫外分光光度计 姓名：XX 专业：生态学 学号：2013XXX 内容提要 紫外分光光度计概述 紫外分光光度计的工作原理 紫外分光光度计设备简介 紫外分光光度计的特点及吸收光谱 紫外可见光谱分析法的应用 分光光度计的进展 一、紫外分光光度计概述 （一）紫外分光光度计的原理 紫外分光光度计是一种常用的理化实验室分析仪器，是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。 这种分子吸收光谱产生于价电子在电子能级间的跃迁，广泛用于无机和有机物质的定性和定量测定。 吸收光的波长范围：200-800 nm: (1)（近）紫外光区: 200-400 nm (2) 可见光区: 400-800 nm (3) 远紫外区：10-200 nm （二）紫外-可见吸收光谱的产生 1.分子吸收光谱的产生——由能级间的跃迁引起 物质分子内部三种运动形式： （1）电子相对于原子核的运动 （2）原子核在其平衡位置附近的相对振动 （3）分子本身绕其重心的转动 分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级 三种能级都是量子化的，且各自具有相应 的能量 分子的内能：电子能量Ee 、振动能量Ev 、 转动能量Er 即 E＝Ee+Ev+Er 分子内运动涉及三种跃迁能级，所需能量 大小顺序： ΔΕeΔΕvΔΕr  跃迁：电子受激发，从低能级转移到高能级的过程。 分子只有选择性的吸收(hν = △E)某些波长 （频率）的光才能由较低的能级跃迁到较高能级上。 若用一连续的电磁辐射照射样品分子，将照射前后的光强度变化转变为电信号并记录下来，就可得到光强度变化对波长的关系曲线，即为分子吸收光谱。 2．紫外-可见吸收光谱的产生 由于分子吸收紫外-可见光区的电磁辐射，分子中价电子（或外层电子）的能级跃迁而产生紫外-可见吸收光谱。 电子能级间跃迁的同时总伴随有振动和转动能级间的跃迁。即电子光谱中总包含有振动能级和转动能级间跃迁产生的若干谱线而呈现宽谱带，即带状光谱。 （线状光谱） （三）分光光度计发展概况 1、1665年，牛顿曾做一个实验：由暗室的小圆孔透过 太阳光，形成了一细太阳束，光束再经过棱镜色散后， 在墙壁上呈现了红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫的色带,这 色带即被称之为“光谱”。 2、1760年郎伯(J.H.Lambert)发现物质对光的吸收与物 质的厚度成正比,后被称之为郎伯定律。 3、1852年比耳发现物质对光的吸收与物质的浓度成正 比,后被称之为比耳定律。 4、20世纪早期已经有了商业化光谱仪,但光谱仪的微小 型化趋势开始于20世纪90年代初期。 5、目前，在国内外都已有了众多的近紫外、可见光 和近红外波长范围的微小型光谱仪的生产商。 国外比较著名的有美国oceanoptiCS(海洋光学) 公司、荷兰AvanteSB.V.公司、日本岛津公司、美国 安捷伦公司、英国oxford工nstrumentS(牛津仪器)等 等。国内的产品主要有上海分析仪器总厂的75和76系 列、上海棱光的551/2/3/4、天美科学仪器有限公司 8500、北京普析通用仪器公司TUZ系列、北京瑞利分 析仪器公司LJvl/9100系列、天津光学仪器厂的wFz系 列等等。 二、紫外分光光度计的工作原理 1、吸光度和透光度 设入射光强度为I0，吸收光强度为