《有机分析实验讲义》.docVIP

实验一 水杨酸的紫外光谱分析 一 实验目的 1、熟悉紫外-可见分光光度计的使用方法。 2、掌握使用经验规则计算有机化合物的最大吸收波长。 3、掌握溶剂极性最有机化合物紫外光谱图的影响。 二 实验原理 具有不饱和共轭结构的有机化合物，在紫外光区（200~400nm）有特征吸收，可为有机化合物的结构解析提供信息。水杨酸又名邻羟基苯甲酸，结构式为 该化合物在紫外光区有吸收，可用紫外可见分光光度计测定该化合物的最大吸收波长，并与紫外光谱λmax 的经验计算值相比较，分析水杨酸的紫外光谱图。溶剂的极性对紫外光谱吸收峰波长和吸收强度有一定的影响。溶剂极性增加，使π→π* 跃迁吸收带红移；使n→π* 跃迁吸收带蓝移。 三 仪器试剂 1仪器：GBC916型紫外分光光度计；石英比色皿（1cm）2只；10ml比色管3只；100ml 容量瓶1只；1ml吸量管1只。 2试剂：水杨酸；,无水乙醇；蒸馏水；正己烷。 四 实验操作: 1、水杨酸紫外吸收光谱的绘制 称取约0.0010g水杨酸，加少量水溶解后加入100ml的容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。再移取1ml水杨酸至10ml的比色管中，用蒸馏水稀释到刻度。将试样倒入1cm的石英比色皿中，以蒸馏水作参比，在220nm~350nm波长范围内进行扫描。绘制紫外吸收光谱图，确定吸收峰波长及其吸收带类型。 2、溶剂极性对紫外光谱的影响 在2支10ml的比色管中，各加入0.0010g的水杨酸（约1粒），分别用乙醇和正己烷稀释至刻度，摇匀。用1cm的石英比色皿，以各自的溶剂作参比，在220nm~350nm波长范围内进行扫描。绘制各自的吸收光谱，比较它们各吸收带λmax的变化，并加以解释。 五 数据处理 1、绘制水杨酸的紫外吸收光谱图，确定其吸收峰波长及吸收带类型。 2、用紫外光谱的经验公式计算水杨酸的λmax，并把计算值与实验值相比较。 3、比较不同极性溶剂，水杨酸紫外光谱吸收带λmax的变化，并加以解释。 实验二 紫外分光光度法测定维生素C的含量 一 实验目的 1、学习759S紫外可见分光光度计的使用方法。 2、学习紫外光谱区测定有机化合物组分含量。 二 实验原理 维生素C又称抗坏血酸,一种含酸性多羟基化合物分子式为C6H8O6分子量176.13；结构式为 维生素C紫外吸收最大245nm附近。维生素C呈无色无臭的片状晶体,易溶于水,不溶于脂溶剂.在酸性环境中稳定, 遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时,,是知名度最高的营养素5nm 范围内每隔1nm测定一个数值。 4 标准曲线的绘制 于最大吸收波长处分别测定标准溶液的吸光度，然后以浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 5 样品的测定 于最大吸收波长处测定试样的吸光度，从标准曲线上查出试样的浓度，平行测定两次。 实验数据记录表格 一 吸收曲线的绘制 标准溶液的浓度：_______________ λ/nm A λ/nm A λ/nm A 最大吸收波长λmax=___________nm 二试样的含量测定 1 标准曲线的绘制： 测量波长：________；标准溶液的原始浓度：___________ 溶液代号 0 1 2 3 4 5 吸取体积/ml 浓度/ug/ml A 2 未知物含量测定 平行测定次数 1 2 吸光度，A 试样浓度，ug/ml 五 数据处理 1.绘制抗坏血酸的吸收光谱图，确定最大吸收波长 2 绘制抗坏血酸在最大吸收波长的标准曲线 3 计算未知液中抗坏血酸的浓度 六 注意事项 抗坏血酸会缓慢氧化成脱氧抗坏血酸，所以每次使用是必须新配置