检测方法集要点.doc

文件名称 检 测 方 法 集 文件编号 HNKL-QMS-C/xxx/00/nn 编写人 审核人 批准人 批准日期 2003/9/18 目录 UV—VIS检测方法 （一）多酚总量分析 1、酒石酸铁比色法 2、FoLin—D比色法测定速溶茶的多酚总量 3、FoLin—C测多酚 （二）贯叶连翘中金丝桃素的测定 （三）越橘中花青素的测定 （四）分光光度法测定多糖含量 （五）分光光度法检测硫酸软骨素含量 （六）茶叶中游离氨基酸总量的测定—茚三酮显色法 （七）黄酮类化合物分析—三氯化铝比色法 （八）葡萄籽提取物中原花青素含量的测定 (九)红车轴草提取物中异黄酮的UV测定 （十）云芝多糖含量的检测方法 （十一）人参皂甙的测定方法 （十二）蜂胶制成品中总黄酮含量的测定 （十三）山楂叶黄酮类化合物提取工艺和测试方法 十四）蛋白质含量的测定-考马斯亮蓝法 （十五）水溶性碳水化合物的检测-蒽酮比色法 HPLC检测方法 (一) HPLC法测定儿茶素 （二）HPLC法测定延胡索乙素 （三）HPLC法测定5-羟色胺 （四） HPLC法测定白柳皮中的水杨甙含量 (五) HPLC法测定大豆异黄酮 （六）HPLC法测定葛根中的葛根异黄酮含量 （七）HPLC法测定红景天 （八）HPLC法测定厚朴中的厚朴酚和和厚朴酚含量 （九）HPLC法测定卡瓦内酯 (十) HPLC法测定蜕皮激素 （十一）HPLC法测定淫羊藿甙 （十二）HPLC法测定枳实多酚 (十三) HPLC法测定枳实辛弗林 (十四) HPLC法测定中药复方 (十五) HPLC法测定白藜芦醇 (十六) HPLC法测定葡萄籽中的原花青素 (十七) HPLC法测定红车轴草 (十八) HPLC法测定苦瓜皂甙 (十九) HPLC-ELSD法测定积雪草甙和羟基积雪草甙 (二十) HPLC-ELSD法测定山药中的薯蓣皂素 （二十一） HPLC-ELSD法测定黄芪甲甙 （二十二） HPLC法测定茶氨酸 （二十三）HPLC测定补骨子中补骨素和异补骨素含量 （二十四）HPLC测定当归中的阿魏酸 （二十五）HPLC测定芍药甙 （二十六）HPLC测定丹参酮ⅡA、隐丹参酮 原子吸收检测方法各类植物提取物及食品中铅的测定（火焰法） 微生物检测方法 一．细菌总数的测定 二．霉菌总数的测定 三．大肠杆菌的测定 GC气相检测方法 一：甲胺磷和乙酰甲胺磷的测定 二：乙酸乙酯的测定 辅料的检测方法 一： 糊 精 二：β-环糊精 三：淀 粉 四：硬酯酸镁 五：氨水(HG1-88-81) 六： 盐酸(GB320-93) 七：酒 精 八：乙酸乙酯 UV—VIS检测方法 （一）多酚总量分析 一、酒石酸铁比色法 1.原理 在一定pH条件下，酒石酸铁与茶多酚类物质形成蓝紫色或紫红色的络合物，在波长540nm处出现最大的吸收，在适当的浓度范围内，茶多酚的量与呈色的深浅成正比，可用分光光度法定量。 2.试剂和主要仪器 1) 酒石酸铁溶液:称取硫酸亚铁(FeSO4.7H2O)1g，酒石酸钾钠(KNaC4H4O6.4H2O)5g加水溶解并稀释至1升。 2) pH7.5的索伦逊缓冲液 A. 1/15M的Na2HPO4溶液:称取磷酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O)11.876g或( Na2HPO4.12H2O)23.876g，加水溶解并稀释至1升。 B. 1/15M的KH2PO4溶液:称取经110℃烘干2h的KH2PO4 9.078g，加水溶解并稀释至1升。 取(A)85ml和(B)15ml混匀，即为pH7.5的缓冲液。 3. 测定方法 1) 茶汤制备 A．茶叶样品:准确称取磨碎试样2g，加200ml沸水，在沸水浴中浸提45min，每隔10 min摇瓶一次，过滤（先用纱布初滤到250ml容量瓶中，冷却后定容，再用滤纸过滤即可）。 B．速溶茶样品:准确称取速溶茶80mg左右，儿茶素40mg左右，红茶100 mg左右等，加水溶解定容至100ml。 2) 测定:准确吸取茶汤1ml，注入25ml容量瓶中，加水4ml，酒石酸铁溶液5ml，用pH7.5的缓冲液定容至刻度，混匀。用10mm比色杯，以试剂空白作参比，于波长540nm处测吸光度A。 3)结果计算 茶多酚(%)=(3.913A/1000)×[(L1/L2)×(M×m)]×100 A—测试液测得的光密度 3.913—按上述条件操作，当光密度等于1.0时，每ml试液中茶多酚的量(mg) M—试液量(g) m—试液干物率(%) L1—总试液量(ml) L2—所取试液量(ml) 二、FoLin—D比色法测定速溶茶的多酚总量 1. FoLin—D试剂 750ml去离子水+100g钨酸钠(Na2WO4.2H2O)+20g磷钼酸+50ml正磷酸(85%磷酸)，混合回流2小时，冷却后定容