海洋来源产酶微物的筛选、鉴定及其外泌产物的生物学作用探索.pdfVIP

海洋来源产酶微生物的筛选、鉴定及其外泌产物的生物学作用探索 摘 要 目的 筛选海洋来源高产酶的细菌、放线菌，对其进行形态学、生理生化性质、分子生物学鉴 定初步确定种属，并研究其生长特性及外泌产物的生物学作用。 方法 对从青岛黄海海域的鱼类、贝类、海水、海泥等样品中分离的产酶细菌、放线菌，分别 用蛋白酶、淀粉酶、胶原酶酶活力测定方法进行高产株的筛选；常规微生物学方法鉴定其形态 及生理生化特性，分子生物学鉴定方法初步确定种属；检测高产株的最适生长温度、pH值、NaCl 浓度以及在不同温度、生长时间、pH值条件下的产酶能力，优化产酶条件；以发酵液上清为样 品，经SDS初步确定分泌物的分子量，研究其酶的最适作用温度、最适作用pH值等；从 酶活性、抗肿瘤活性、免疫活性等方面初步探索代谢物的生物学作用。 结果从鲳鱼消化道中筛选出高产蛋白酶菌株XF-1，16SrRNA基因测序和系统发育树分析证实 在奶粉平板上的菌落：直径t-2硼，圆形乳白色、光滑、边缘整齐、半透明。其生长温度范围 浓度为0-6％，最适浓度为1％；所产蛋白酶活力约145 u／mg，最佳产酶条件为pH7．5、25C振荡 为7．5；XF一1可以分泌多种物质，对酪蛋