实验五小鼠骨髓染色体的制备与c带染色.pptVIP

实验八：小鼠骨髓染色体的制备与C带染色 一.小鼠骨髓染色体的制备 学会小鼠骨髓染色体标本的制备 【实验原理】 处于分裂期的细胞经秋水仙素处理,由于阻断了纺锤丝微管的组装,使细胞分裂停止于中期,此时染色体达到最大收缩,具有典型的形态。 本实验所用的小鼠骨髓细胞具有高度的分裂活性并且数量非常多,经秋水仙素处理后,可使分裂的细胞阻断在有丝分裂中期,再经低渗、固定、滴片染色等处理,便可制作较好的小鼠骨髓细胞染色体标本。 【仪器、材料和试剂】 （一）仪器显微镜,温箱,冰箱,离心机,天平。 （二）材料 解剖器皿(解剖盘,剪刀,镊子),注射器(1mL),4号针头,6号针头,纱布,脱脂棉,酒精灯,试管,试管架,滴管,50mL烧杯,染色缸,洗耳球,量筒,载玻片(实验前将载玻片浸入50％的酒精溶液中,置4℃冰箱中至少1h)。 （三）试剂 0.85％生理盐水,冰醋酸,甲醇,Ph6。8PBS,Giemsa染液,75％酒精,蒸馏水,秋水仙素(1mg/mL),0。075mol/lKCl。  1．秋水仙素:以1mg/mL的浓度溶于0.85％生理盐水中。 2．低渗液: 0.075mol/lKCl取5.59gKCl加到1000mL蒸馏水中,在37℃下预热。 3．固定液:甲醇:冰醋酸以3:1配制(新鲜的) 【实验步骤】 1.取雌雄小鼠各一只,注射秋水仙素0。1mL于腹腔中,经3。5- 4h后拉颈椎处死。 2.剪开