选修三DNA重组技术的基本工具(详细)精要.pptVIP

限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。 （1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 （2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。 （3）在DNA连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？为什么？ 可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的） 小试身手 载体的作用 载体的必要条件 载体的种类 阅读课本第6页“分子运输车”——运载体的相关内容，填写下表 自主学习 1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2）具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 3）具有某些标记基因，便于进行鉴定和选择。 4）必须是安全的 ，对受体细胞无害。 5）载体DNA 分子应大小适中，以便于提取和操作 1）作为运载工具，将目的基因导入受体细胞中 2）在受体细胞内对目的基因进行大量复制 ①细菌的质粒 ②病毒：λ噬菌体衍生物、动植物病毒等。 有标记基因的存在，可用含青霉素的培养基鉴别。 有切割位点 能复制并带着插入的目的基因一起复制 质粒——裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 最常用运载体——质粒 实际上在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 A A T T G C A A T T A A T T DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶的作用 返回 1. 科学家们经过多年来的努力，创立了一种新兴生物技术——基因工程，下列关于该技术的叙述不正确的是(　 　) A．该技术在生物体外对DNA分子进行改造 B．它是在分子水平上进行操作的生物工程 C．该工程实现了一种生物的基因转接到同种生物的其他个体DNA上 D．实施基因工程的最终目的是定向地改造生物的遗传性状 C 2.下列有关基因工程中限制酶的描述，错误的是 A.一种限制酶只能识别一种特定的脱氧苷酸序列 B.限制酶的活性受温度的影响 C.限制酶能识别和切割RNA D.限制酶可从原核生物中提取 C 3：同一种限制酶切割成的黏性末端是 A. ①② B. ①③ C. ①④ D. ②③ A 4．如下图所示，两个核酸片段在适宜条件下，经X酶的催化作用，发生下述变化，则X酶是(　　) A．DNA连接酶　B．RNA聚合酶 C．DNA聚合酶 D．限制酶 D 5：质粒是基因工程中最常用的载体，它的主要特点是 ①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构简单 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦对宿主细胞无害 A.①③⑤⑦ B.②④⑥ C.①③⑥⑦ D.②③⑥⑦ C D 6.下列关于DNA连接酶的叙述正确的是(　　) ①催化相同黏性末端的DNA片段之间的连接 ②催化不同黏性末端的DNA片段之间的连接 ③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成 ④催化DNA分子两条链的脱氧核糖与磷酸之间磷酸二酯键的形成 A．①③　　　　　　　B．②④ C．②③ D．①④ 7.在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） A.同种限制酶 B. 两种限制酶 C.同种连接酶 D. 两种连接酶 A 8.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 9.关于磷酸二酯键说法正确的是( ) A．只有目的基因中存在 B. 只有质粒中存在 C．DNA单链或双链分子中都存在 D．只存在于双链DNA分子中 C 10．下列有关基因工程的说法正确的是( 　) A．限制酶只能从原核生物中分离纯化而来 B．限制酶识别并切割特定双链DNA后可产生黏性末端或平末端 C．T4DNA连接酶来自T4噬菌体，只可将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来 D．天然质粒均可用于基因工程作为载体，且均不用经人工改造 B 11.下列关于限制性核酸内切酶的叙述中，错误的是(　　) A．它能在特殊位点切割DNA分子 B．同一种酶切割不同的DNA产生的黏性末端能够很好地进行碱基互补配对 C．它能任意切割DNA，从而产生大量的DNA片段 D．每一种限制性核酸内切酶只能识别特定的核苷酸序列 C 12.下列关于DNA连接酶的