人胎盘源间充质细胞成骨分化过程中免疫原性上调的研究.pdf

指导小组成员：顾巧丽 古彦铮 人胎盘源间充质干细胞成骨分化过程中免疫原性上调的研究 摘 要 摘 要 目的：探讨间充质干细胞（MSCs ）在成骨分化过程中的免疫原性改变及其分 子机制。 方法：用酶消化法获得人胎盘源间充质干细胞（PMSCs ），并对其进行鉴定后， 分别在体外和体内条件下，诱导其成骨分化。体内外成骨诱导 7 天后用流式细胞 术（FCA ）分别检测细胞表面协同刺激分子的表达情况；同时用成骨诱导后的细 3 胞分别与T 细胞共培养，H-TdR 掺入法或CCK8 方法检测T 细胞的增殖。利用茜 素红染色、ALP 活性检测、micro-CT、HE 染色等方法检测MSCs 体内外成骨效 应，分析成骨效应。 结果：1）成功分离培养PMSCs ；2 ）体内外实验均显示PMSCs 成功向成骨 细胞分化，未分化的PMSCs 不表达CD28、CD80、CD83、CD86、B7DC 等正性 共刺激分子，但经成骨诱导分化后其表达上调；并且成骨诱导分化后的PMSCs 促 进了T 细胞增殖，而未诱导分化的PMSCs 则未能促进；3 ）PMSCs 在体内成骨分 化后 CD28、CD80、CD83、CD86、B7DC 等正性共刺激分子上调程度较 PMSCs 在体外成骨更高。 结论：未分化的PMSCs 具有低免疫原性，但是在经成骨诱导分化后其免疫原 性上调；PMSCs 在体内成骨分化过程中，免疫原性上调程度较体外成骨分化高。 这对于间充质干细胞今后在临床的应用有很好的参考价值。 关键词：胎盘源间充质干细胞；成骨诱导；协同刺激分子；T 细胞增殖 作 者：王贵超 指导教师：施 勤 Ⅰ Abstract Study on upreguleted immunogenicity of human placenta-derived mesenchymal stem cells during osteogenesis Study on upreguleted immunogenicity of human placenta-derived mesenchymal stem cells during osteogenesis Abstract Objective To investigate the alteration of mesenchymal stem cells‘ immunogenicity and involved molecular mechanisms during osteogenesis. Methods Human placenta-drived mesenchymal stem cells(PMSCs) were isolated from human placenta by trypsin-digesting. After being confirmed by flowcytometer (FCM) and chondro- and adipogenic differentiation they were induced to osteoblastes in vivo and vitro respectively. The costimulatory molecules were detected by FCMbefore and after PMSCs were induced