双歧杆菌dna提取及对小鼠il-2、nk活性影响的研究.pdfVIP

中文摘要 名 言 目前国内外学者较普遍的看法是双歧杆菌可能是一种佐剂或 免疫应答调节剂，参与机体单核巨噬细胞或B、T淋巴细胞有关的 免疫应答反应。有的研究表明双歧杆菌能促进机体某些细胞因子 的表达，提高机体的免疫功能，但关于双歧杆菌DNA对小鼠免疫 功能影响实验研究的资料报道尚少。、，-一 本研究从双歧杆菌、大肠杆菌提取DNA，用DNA免疫小鼠， 观察免疫功能的变化，探讨双歧杆菌DNA免疫激活作用，并与大 肠杆菌DNA作对比研究，为双歧杆菌DNA、大肠杆菌DNA对免 疫系统的激活及动态调节作用提供实验依据。 l方 法 (1)DNA提取：双歧杆菌茵株来源，雀巢公司提供，经鉴定，符 合双歧杆菌特征。大肠杆菌由北京生物制品检定所提供，增菌培 养后，提取DNA，并作定性、定量分析，验证为DNA。 (2)DNA免疫激活作用的研究：用双歧杆菌DNA、大肠杆菌 DNA对Balb／C小鼠肌肉注射后，再皮下注射DNA，颈椎处死后， 检测脾细胞的免疫功能，同时提取小肠上皮间淋巴细胞(intestinal intraepithelial 细胞的激活情况及细胞因子诱生情况，探讨双歧杆菌DNA是否 有免疫束4激作用，并与大肠杆菌DNA作对比研究。 结 果 双歧杆菌DNA、大肠杆菌DNA肌肉注射后，小鼠以IL一2 诱生能力和NK活性两项指标与相应对照组比较，均发现有明显 水平的程度大于大肠杆菌DNA的作用(PO．01)。 讨 论 双歧杆菌是人类及某些哺乳类动物肠道中占优势的细菌，人 们普遍认为双歧杆菌的总数量反映了机体的健康状况，它们对维 持肠道内微生态平衡起重要作用Ill。双歧杆菌能分泌多种酶，促进 蛋白质，脂肪和糖的代谢，能降低肠道氧化还原电势，有利于铁、钙 和维生素D的吸收，并能合成维生紊B。大量资料证实，双歧杆菌 的存在，利于宿主的消化、吸收、营养，另一方面对抗感染、免疫、抗 肿瘤等方面又具有重要作用。 近年来，除对双歧杆菌整体免疫激活作用的研究较多之外，双 歧杆菌提取物，如细胞壁肽聚糖(WPG)、脂磷壁酸(LTA)、细胞壁 (B-一Cw)等的免疫激活作用也越来越受到重视。蓝景刚乜3等将双 岐杆菌LTA、WPG等注入小鼠腹腔。一段时间后，小鼠自然杀伤 细胞(NK)、淋巴因子活化的杀伤细胞(LAK)活性和干扰素一7 增强。其中，LTA作用最强，WPG次之。双歧杆菌细胞壁(B— CW)可以诱发小鼠腹腔T细胞的增殖反应，也能增加外周血 NO。一含量，激活巨噬细胞，增强机体免疫力o]。NK是一种广谱杀 瘤细胞，B-—二w可以通过增强机体NK活性发挥抗肿瘤作用。 双歧杆菌与大肠杆菌均为机体肠道中的重要正常菌群，微生 物的DNA中含有CpG(胞嘧啶一磷酸一鸟嘌呤)免疫刺激DNA DNA 序列(Immunostimulatory 的免疫刺激DNA寡核苷酸序列通过IL一6的分泌启动体液免疫 系统，而通过IFN一7的分泌启动细胞免疫系统M。CpG免疫刺激 DNA序列能在数小时内使脾淋巴细胞株产生Th。细胞相关的IL —12和IFN一丫，以及Th2细胞相关的IL一6【s】，并选择性地诱导 ·2’ Th，应答。肌肉注射没有表达蛋白功能的寡聚DNA，也可以刺激 机体产生IL÷12等细胞因子i并且认为IFN一7是由CpG活化 的∞俺诱导韵NK细胞分泌的，而且在这个过程中不需要T细胞 ： 、 ；。‘‘、 0 的参与‘63 ’，iSS已被证实可有效地激活多种免疫耩性细胞。，Krieg报道， 含有朱甲基钝的Q《‘结梅@l策端有霰爷曝呤，赘末端存‘2令嘧 嚏》的单链募核昔酸是露细胞的有丝分裂原；研诱导耳细胞增殖， 而盟还回激活巨噬细胞，使其分