应用组织芯片和胞芯片技术研究肺癌中fhit和相关蛋白的表达及其生物学意义.pdfVIP

天津医科大学硕士研究生论文 应用组织芯片和细胞芯片研究肺癌中FHIT和相关蛋白的 表达及其生物学意义 摘 要 目的： 本课题应用免疫组化方法研究FHIT、MSH2及P21在肺癌和癌前病变组织芯 片及细胞芯片中的表达情况及其在肺癌中与各临床病理参数之间的关系，并研 究了三种蛋白之间的相关性。希望为肺癌的发生、发展、治疗及判断预后提供 理论依据；并进一步验证细胞芯片，为快速、简便、经济、规范地进行各项细 胞学检查提供一种新方法。 方法： 及P21蛋白的表达，组织芯片包括原发肺癌89例，淋巴结转移性肺癌12例， 肺癌癌前病变12例以及正常肺组织10例，并结合肺癌的临床病理特征进行分 析；细胞芯片包括含有肿瘤细胞的肺癌患者的胸水50例、非肿瘤患者胸水6例。 应用SPSSll．5版软件包进行数据处理。 结果： 1．FHIT蛋白阳性产物主要定位于胞浆。在原发性肺癌、癌前病变组织和淋巴结 转移癌组织中失表达率分别为46．1％、41．7％和50．o％，而在10例正常肺组 织中F}IIT均有表达。原发性肺癌组、癌前病变组和转移癌组FHIT蛋白的失 表达率均高于正常组(pO．05)；原发癌与转移癌、原发癌与癌前病变、癌前 组织学类型，分化程度以及患者的吸烟史相关且有统计学意义(P0．05)， 而与性别，年龄，临床分期，是否伴有淋巴结转移以及肉眼类型无关(pO．05)． 2．MSH2蛋白阳性产物主要定位于胞核。在正常组、癌前病变组织、原发性肺癌 天律医科大学硕士研究生论文 和淋巴结转移癌组织中失表达率分别为lO％、33．3％、51．7％和50．0％，原发 性肺癌组MSI{2蛋白的失表达率高于正常组(p(0．05)；正常组与癌前病变组、 正常组与转移癌组、原发癌与转移癌、原发癌与癌前病交、癌前病变与转移 关。而与性别、年龄、肉眼类型、临床分期及是否伴有淋巴结转移无关 (pO．05)． 3．P21蛋白阳性产物主要定位于胞浆或核，在各组中的阳性率分别为：正常组 90．096，癌前病变组75．096，原发性肺癌组“．9％，淋巴结转移性肺癌组25．096； 正常组和癌前病变组阳性率显著高于原发性肺癌组和淋巴结转移性肺癌组 (JD0．05)，正常组与癌前病变组、原发性肺癌组与淋巴结转移性肺癌组之 间阳性率差别无统计学意义(庐O．05)．在原发性肺癌中P21蛋白的表达与 分化程度、临床分期及有无淋巴结转移有关：其中高+中分化组高于低+未 分化组(pO．05)，且随着肿瘤恶性程度的增加P21表达有逐渐降低的趋势 病人的年龄、性别、组织学类型及肉眼类型无关(均为pO．05)． 4．经Spearman等级相关分析，三种蛋白在组织芯片中表达的相关关系结果为： 达无明显相关(p0．05)。 5．用我们的方法制作出的细胞芯片排列整齐，分布均匀，无掉片，符合观察需 要。HE染色镜下每点均可见具有诊断意义的肿瘤细胞，基本无重叠现象。 检测结果与同时制作的相应涂片进行比较，结果完全一致。对细胞芯片进行 了FHIT，MSH2，p21免疫组化染色后，细胞无明显减少，胞浆或胞核呈棕黄 色颗粒状。所得阳性结果与各例相应涂片检测结果完全一致。将细胞芯片检 测结果与进行FHIT，MSH2，p21免疫组化染色的组织芯片中Ⅲ+Ⅳ期肺癌的 检测结果进行比较，差异均无统计学意义(P0．05)． n 天津医科大学硕士研究生论文 结论： 1． FHIT、MSH2、P21基因在肺癌表达下降，提示他们参与肺癌的发生、发展。 FHIT基因在癌前病变中表达下降，提示其改变可能是肺癌的早期分子事件。 在鳞癌伴有吸烟史者中失表达率高，提示FHIT基因可能在与吸烟相关的肺 癌形成过程中起一定作用。DNA错配修复基因MSH2表达强度与肺癌的分化程 度呈正相关关系，肿瘤细胞分化程度越低，恶性程度越高，这提示MSH2蛋 白的丢失与细胞获得恶性表型有关。P21蛋白在肺原发癌中，其表达强度 与肺癌的分化程度呈正相关关系，随着肿瘤细胞分化程度的降低，P21蛋白 表达降低，肿瘤细胞分化程度越低，恶性程度越高，且其表达强度还与肺 癌的临床分期呈负相关