九香虫水提液对两种癌细胞的作用研究.pdfVIP

第 33卷 第 1期 广西师范大学学报 ：自然科学版 Vo1．33 NO．1 2015年 3月 JournalofGuangxiNormalUniversity：NaturalScienceEdition M ar．2Ol5 九香虫水提液对两种癌细胞 的作用研究 于 声 ，段斯亮 ，李海叶 ，黄富平 (1．广西科技大学 医学院，广西 柳州 545005 2．广西师范大学 化学与药学学 院，广西 桂林 541004) 摘 要 ：本文研究九香虫水提取液对人 胃癌细胞 SGC一7901和肝癌细胞 HepG 增殖抑制及细胞周期 的影响 。 设置九香虫水提液药物组和正常对照组 ，应用倒置 显微镜观察细胞形态 ；采用 MTT法观察水提液对两种细 胞 的增殖抑制作用 ；利用流式细胞术分析其对两种细胞周期的影响。结果显示 ，九香虫水提液可使两种细胞 变 圆，脱壁细胞增 多 ，细胞 间空 隙增大 ，细胞碎片增 多 ；MTT实验显示 ，水提液能抑制 SGC一7901细胞和 HepG2细胞 的体外增殖且呈 明显的剂量依赖性，对 SGC-7901细胞和 HepGz细胞 的 ICs。分别为 154．24、 129．46mg／L。流式细胞术结果显示 ，九香虫水提液使两种细胞 的 s期和 G。／M 期 比例增加 ，G。／G 期细胞 比例降低 ，表明九香虫水提取液能抑制 SGC一7901和 HepG 细胞的体外增殖 ，其机制可能是 由于细胞周期的 阻滞 。 关键词 ：九香虫；水提取液；细胞增殖 ；细胞周期 ；SGC一7901；HepGz 中图分类号：R285．5；R931．74 文献标志码 ：A 文章编号 ：1001—6600(2015)01—0104—05 0 引言 癌症严重威胁人类的生命 ，国内外学者一直在探索对付癌症 的方法。早在几千年前 的中国就有对癌 症的记载，那时主要是靠中药材来治疗癌症 ，近年来 ，随着对抗肿瘤中药的深入研究，人们发现抗癌药用昆 虫具有综合调理功能、毒副作用少等优点，是抗癌治癌的重要手段之一I1]。因此 ，国内外很多学者都致力 于抗癌药用昆虫的药理学研究uj。 九香虫 (AspongopuschinensisDallas)，俗名 ：打屁虫、屁 巴虫等 ，隶属于半翅 目、蝽科l2]。经 医学验 证 ，九香虫具有抗炎、抗菌、抗癌、纤溶、解痉 、镇痛及恢复机体免疫功能等作用 3]，但是其抗癌作用 的机制 尚不十分清楚，仅见侯晓晖等 。利用九香虫的氯仿和乙醇粗提物进行肿瘤细胞的体外实验。用水提取中 药是中药复方制剂中运用最为广泛的工艺步骤，以水为媒介，廉价易得 ，操作简单方便 ，提取条件与中药传 统汤药剂型较吻合 。为了进一步探讨水溶性成份的抗癌效果 ，本实验在前期研究 的基础上，检测了九香 虫水提取液对人 胃癌细胞 SGC一7901和肝癌细胞 HepG 细胞增殖 的抑制作用 ，期望能为九香虫的药物开 发提供实验依据 。 1 材料和仪器 1．1 细胞株 人胃腺癌细胞株 SGC7901，购 自中科 院细胞库 ；人肝癌细胞株 HepGz，由遵义医学院中心实验室 惠赠 。 收稿 日期 ：2014—10—08 基金项 目：国家 自然科学基金资助项 目；广西 自然科学基金资助项 目(2012GXNSFBA053017)；药用资源化 学与药物分子工程教育部重点实验室资助项 目(CMEMR2013一Ao5) 通信联系人 ：黄富平 (1982一)，男，安徽黄山人 ，广西师范大学副研究员，博士 。E—mail：huangfp2006@126．corn 第 1期 于声等 ：九香虫水提液对两种癌细胞 的作用研究 1O5 1．2 九香虫样品 九香虫采集于贵州省遵义市习水县 (贵州大学昆虫研究所鉴定)。将野外采集的九香虫鲜虫放置烘箱 中干燥 ，使用前将其研磨成粉末 。 1．3 主要试剂 四甲基偶氮唑蓝 (MTT)购于 Solarbio公司 ；胎牛血清购于浙江天杭生物科技有限公司；青霉素、链霉 素购于鲁抗制药；胰蛋 白酶购于 Solarbio公司；RPMIMediumDMEM 培养基购于 GIBCO公司；二 甲亚