人黑色素瘤相关原mage-b18与核因子kb调控蛋白tnip1相互作用的研究.pdf

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人黑色素瘤相关原mage-b18与核因子kb调控蛋白tnip1相互作用的研究

人黑色素瘤相关抗原MAGE.BI$与核因子KB调控蛋白TNIPl相互作 用的研究 中文摘要 目的:旨在探讨人黑色素瘤相关抗原MAGE.BIg与核因子KB调控蛋白TNIPl间的 相互作用,同时确定其相互作用的结合位点,从而了解其相互结合的具体分子机制。 在明确其分子作用机制后,采用多种手段证实其下游信号转导机制。为该抗原的功 能研究奠定基础。 方法:将人核因子K 互作用。确定其能够相互结合后,使用PCR方法构建这两种蛋白缺失不同结构域的 突变体携带HA及Myc标签的真核表达载体并使其在293T细胞中表达后;再次使 用免疫共沉淀确定其具体的结合位点。了解其相互结合的集体分子机制后,使用 293T细胞活化后细胞凋亡率的变化。 功构建了人核因子K 签蛋白的突变体,并且成功地在293T细胞中进行了表达。并且鉴定出了TNIPl以 K 抑制细胞凋亡。 结论:黑色素瘤相关抗原MAGE.BI$可以与人核因子KB调控蛋白TNIPl在细胞内 发生相互作用。同时这两种蛋白可以发生协同效应,从而抑制核因子KB活化。同 时,在这两种蛋白的共同作用下可以显著抑制由于NF.r,B活化所产生的细胞凋亡。 础。 关键词:肿瘤; 黑色素瘤相关抗

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