人脑挫伤后hs70、bfgf和cox2免疫组织化学研究.pdf

中文摘要 劈—]芰 ， 、 (随着医学界对中枢神经系统创伤后分子病理学认识的提高以 及免疫组织化学技术的进步，人们从免疫组织化学角度，对脑挫伤 与时间的关系做了大量的研究。由于受到检材要求所限，在此方 面的研究多为模拟脑挫伤的动物实验，从而造成了理论研究与实 际鉴定工作相“脱钩”的现象。j， 目前，已有人分别应用免疫组织化学技术对热休克蛋白70 标的表达在伤后均呈现出一定的变化规律，但未见有人将HSPT0、 实际工作中的案例标本，应用免疫组织化学染色，旨在了解人脑挫 变化关系，同时观察尸体解剖标本与动物实验标本免疫组织化学 的差别，为脑挫伤时间判定实际鉴定工作提供一条可行的理论依 据。 实验材料与方法 伴有明显大脑皮质挫伤灶的35个案例，分成7个实验组，对照组 选取非颅脑损伤且急性损伤致死5个案例，各组男女不限，年龄在 19-58岁之间，平均年龄为38．09岁。 2．免疫组织化学染色方法。石蜡切片常规脱蜡至水；3％H2 ·1· 染，脱水、透明、封片。 3．图像分析与统计学处理。应用MOTICAM1300图像分析 仪，对免疫组织化学染色呈阳性的细胞定量检测其灰度值，然后在 SPSS10．0for Window软件下进行统计学处理。 ～～j窭验结果 性神经细胞灰度值最小，与其它各实验组相比有显著差异(P 0．01)。随挫伤时间的延长，神经细胞的HSP70灰度值逐渐增大， 灰度值有所下降，10．5—11．5d组HSP70灰度值又再次升高。 胞灰度值最小，与其它各实验组相比有显著差异(P0．01)。 值缓慢升高，至10．5—11．5d组，灰度值达最大。 胞灰度值达最大，与其他各实验组相比有显著差异(P0．01)， 10．5—11．5d组未见COX2的表达。 讨 论 HSP70与对照组相比没有差异。本实验检测人脑挫伤后结构型 ·2· HSPTO的表达情况，结果显示，各实验组中，即刻死亡组神经细胞 HSPTO表达最强，HSPTO表达在损伤后1d显著下降，以后随着脑 挫伤时间的延长而有所恢复，这与Seidberg的实验结果存在较大 差异，原因是本实验案例的颅赫损伤程度较Seidberg的实验对象 更为严重，同时所采用的实验方法也不相同，所以，实验结果存在 较大的差异。因此，可以用结构型HSPTO免疫组织化学染色推断 人脑挫伤时间。 鼠脑损伤后I周，bFGF免疫活性显著增加，其阳性细胞大多数类 似于反应性星形胶质细胞。Frantschy等检测大鼠中枢神经系统 损伤后bFGF蛋白表达情况，发现在损伤灶周边区的早期反应(4h 到7d)中增加的bFGF表达大多数存在于MAC阳性细胞(巨噬细 胞和／或胶质细胞)中。本实验即刻死亡组的阳性神经细胞bFGF 表达最强，伤后Izd内随时闻的增加其表达不断下降。本实验 bFGF表达与动物实验差异的形成原因可能有以下几个方面：①实 验对象的差异。②颅脑损伤程度不一致。③由于脑损伤后，挫伤 周边区反应性缺血、缺氧，细胞反应性减低，从丽抑制蛋白质的合 成。因此，可以用bFGF免疫组织化学染色推断人脑挫伤时同。 3．COX2免疫组织化学染色结果分析。Strauss等人在大鼠外 伤性脑损伤后COX2表达研究中发现，神经缅胞COX2免疫活性 于伤后2h、24h和3d时升高，其中在24h显著增加，于伤后7d返 回至对照组水平。本实验检测人脑挫伤后COX2的表达情况，结 果发现，重度颅脑损伤后COX7．表达开始升高，在伤后ld左右达 峰值，以后逐步下降，其表达变化规律同Strauss等人的实验结果 达迅速下降，显著低于对照组，伤后lld，COX2．表达消失，造成此 种现象的原因可能是本实验采用了人体重度颅脑损伤的案例标 本，在实验对象及损伤程度上与动物实验存在较大差异，同时人脑 ·3· 挫伤周边区反应性缺血、缺氧，细胞反应性减低抑制蛋白质合成。 因此，可以用COX2免疫组织化学染色推断人脑挫伤时间。y