沙门菌质粒毒力因spvb抗体的制备及其对nf-κb通路的影响.pdfVIP

沙门菌质粒毒力基因spvB抗体的制备及其对NF-κB通路的影响 中文摘要 中文摘要 目的： 沙门菌质粒毒力基因spvB编码产物具有ADP核糖基转移酶作用，与细菌毒 力关系密切，目前该基因的功能还有很多未知。本研究第一部分通过对沙门菌质 粒毒力基因spvB进行生物信息学分析、克隆表达并制备相应抗体，为后续深入研 究该基因的功能提供工具和手段。第二部分通过建立沙门菌感染的巨噬细胞模型， 研究spvB对NF-κB信号通路相关蛋白IκBα和p65等表达的影响；利用与真核表 达载体连接的重组质粒pEGFP-N1-SpvB瞬时转染HeLa细胞，进一步分析spvB对 NF-κB通路的影响，探讨该基因对宿主菌毒力影响的分子机制。 方法： 一 沙门菌质粒毒力基因. spvB 的原核表达及其抗体的制备 1. 通过生物信息学软件分析spvB基因及其编码的蛋白，选取抗原性较高、易 表达的氨基酸序列作为克隆序列。 2. 根据spvB 基因序列设计引物，以携带spvB 基因的野生型鼠伤寒沙门菌 （SalmonellaentericaserovarTyphimuriu